食品微生物检验方法问题研究
摘要：本文介绍了食品微生物检验的主要内容，详细阐述了几种检验方法，旨在为食品微生物检验方法问题研究提供一些有价值的参考。
关键词：食品；微生物；检验方法
1.前言
近年来关于食品安全问题层出不穷，食品安全越来越受到人们的关注。如何加强食品安全检验，使人们吃到放心食品是质检部门的工作重点。微生物污染是目前常见的食品安全问题，由此引发的食源性疾病呈逐渐增加的发展趋势。造成食品微生物污染的因素众多，食品的生产、存贮、运输过程均有可能造成微生物污染。加强食品微生物检验力度，提高检验水平是减少食品安全问题的有效手段，本文介绍了食品微生物检验的主要内容，详细阐述了几种检验方法，旨在为食品微生物检验方法问题研究提供一些有价值的参考。
2.食品微生物检验内容
2.1污染程度指标菌
通过污染程度指标菌的检验，能够有效判定检验食品的污染程度[1]，一般是将受检食品样本经过特定处理后培养得出的单位菌落个数。
2.2大肠菌群
大肠杆菌是评估食品质量的重要指标之一[2]。由动物粪便产生，指通过温度为37℃环境下培养24小时候得出的能够产气、产水、发酵乳糖、厌氧或需氧的革兰氏染色阴性无芽孢杆菌。
2.3致病菌
对于常见菌的适量，相关食品微生物学检验标准已有明确的规定。因此，在进行食品微生物检查中除了检验污染程度指标菌和大肠菌群的数量，还要进行致病菌数量的检验，常见的致病菌有志贺氏菌、沙门氏菌、霉菌等。
3.食品微生物检验方法
3.1.抗阻检验法
抗阻检验法一般用于食品中大肠杆菌以及霉菌的检验。其基本原理为：在细菌培养过程中，对惰性物质进行分解，以此代谢出电活性物质，这些物质在游离过程中会增加培养细菌的导电性，从而改变阻抗。不同细菌产生的阻抗不同，可以此作为检测依据，对细菌进行有效检测。该检验法的优点在于：所需检验时间段、反应快速、敏感度高，且具有很强的特异性，能够重复检验，便于推广使用。
3.2.荧光分析与色谱检验法
荧光分析与色谱检验法均是通过检验微生物生长过程中存在的物理特性完成鉴定。荧光分析检验法主要有两种，一种是直接计算细菌数量，将微生物进行荧光染色处理，激光光束聚焦整形后，对受检样品进行垂直照射，经过处理的受检样品在激光的强烈照射下出现散射光，荧光也因此被激发。通过荧光的强弱进行细菌核内物质浓度或细菌膜抗原强度判定，通过散射光进行细菌体积的判定。最终计算出受检样品细菌数量。另一种的采用酶联荧光免疫分析技术，通过微生物的特意反应将受检细菌分离出来，再通过荧光的强弱进行阴性或阳性判定。色谱检验法是通过检验细菌在代谢过程中产生的饱和脂肪酸含量，从而进行微生物检验[3]。由于荧光分析与色谱检验法是通过细胞DNA、体积等物理特征进行检验，检验范围有限，只能进行真核生物的检验。且检验成本相对较高，不利于推广使用。
3.3酶联免疫吸附检验法
酶联免疫吸附检验法一般用于大肠杆菌、军团菌、沙门氏菌等细菌检验，该方法利用酶的催化作用以及抗原抗体免疫反应的特异性，将二者有机结合，形成一种检验方法。实践证明[4]，在进行沙门氏菌检验过程中，使用克隆抗体制备试剂作为检验剂，可检验出最低500cfu/g。该方法的优点在于：能够有效进行定量、定性测量，以及抗体、原体测量。但所需检验过程需要较长时间，特异性与灵敏度仍有提升的空间。
3.4.放射测量檢验法
放射测量检验法的基本原理为：在培养细菌生长过程中放入14C碳水化合物，通过细菌代谢产生 ，再使用仪器测量 变化情况，以此进行受检样品细菌鉴定。例如，在培养细菌中投入 葡萄糖，若受检样品内存在细菌，则经过细菌代谢后可能出现以下现象：(1) 葡萄糖经过细菌代谢后释放出气态 ，则通过氢氧化季铵盐收集，再使用仪器检查受检样品的细菌情况。(2) 葡萄糖被细菌吸收至体内，通过仪器检验受检样品的放射性。通过有无放射性判定有无细菌，通过放射性强弱判定细菌数量。放射测量方法是结合了多种化学、物理技术于一身的检验方法，一般用于血培养基中的细菌检验。
3.5聚合酶联反应检验法
聚合酶联反应检验法利用基因扩增进行细菌检验的一种方法，主要用于难以进行培养或根本无法培养的细菌检验。其基本原理为利用酶生物素、半抗原等标记物或其他放射性同位素进行特异核苷酸片段标记，以制作核酸探针进行细菌检验。该方法的灵敏度非常高，但是由于受检物质在进行长时间的纯化处理，对操作人员具有非常高的技术水平要求，因此难以进行推广应用。
3.6生物传感器检验法
生物传感器检验法是利用生物传感器进行微生物检验，传感器的主要组成部分有理化换能器和生物敏感元件。基本原理为：通过敏感元件与微生物产生反应，利用理化转换器进行该反应的捕获，将反应程度表达成连续的或离散的数字信号，通过信号进行受检物质检测。生物传感器检验法是生物科学、信息科学、物理科学以及化学科学等多项科学交叉结合形成的综合型技术[5]，能够快速有效分析受检物质，满足目前日益复杂的受检样品的检验需求。
生物传感器检验法主要包括以下两种：(1)生物发光传感器检验。该方法具有良好的特异性，且能够对死菌与活菌进行有效区分，逐渐被推广应用，不足之处在于检验过程所需时间过长，且灵敏度尚待提高。(2)光学传感器检验法。该方法是在传感器表面固定受检物体，通过厚度变化使光产生折射，传感器通过该变化进行细菌检验。具有成本低、操作简便、检查迅速等优点，不足之处在于检查范围受限，仅能够进行特点细菌检验，且灵敏度尚待提高。
生物传感器检验法作为一种新型的检验方法，其优势越来约得到人们的肯定，随着科技的不断发展，该检验方法得到不断的完善与进步，朝仪器微小化、功能多样化方向发展，具有非常高的推广价值以及很好的发展前景。
4.结束语
综上所述，食品微生物检验是保障食品安全的重要手段，必须引起高度重视。通过食品的微生物检验，能够有效进行食品质量控制，有助于人们提高对食品安全的信任度。食品微生物的检验方法多样，可根据检验情况选择最佳的检验方法，随着科技水平的不断提高，检验方法也在不断完善与发展，检验质量也得到了进一步提高。同时，检验人员应充分认识到自身的工作职责，严格遵守工作制度，按规定进行食品检验，以确保检验结果的准确性。
参考文献：
[1]郑幸福，杨义凤，卿玲，米斌，周良君.2006～2009年绵阳市城区学校食品卫生监测结果分析[J].预防医学论坛，2010，01(11)：107-121.
[2]邢丽萍，李萍，王文，殷晨.呼和浩特市售保健食品微生物污染状况调查分析[J].预防医学情报杂志，2010，06(09)：612-615.
[3]杨虎，向文良，张弛，孙烨琨，王璐，黄敏，孙群.培养和非培养法分析冷藏鸡肉胴体中的细菌多样性[J].微生物学通报，2010，07(10)：744-749.
[4]白梅，王娟，卿蔓君，包秋华，孙天松，张和平.内蒙古西部区酸粥中酵母菌的分离鉴定及优势菌分析[J].微生物学通报，2010，04(09)：307-310.
[5]赵贵明，杨海荣，赵勇胜，袁飞，暴书婵，陈颖.MALDI-TOF质谱技术对克罗诺杆菌的鉴定与分型[J].微生物学通报，2010，06(08)：884-887., http://www.100md.com(张天才 陈德珍 张保国)
关键词：食品；微生物；检验方法
1.前言
近年来关于食品安全问题层出不穷，食品安全越来越受到人们的关注。如何加强食品安全检验，使人们吃到放心食品是质检部门的工作重点。微生物污染是目前常见的食品安全问题，由此引发的食源性疾病呈逐渐增加的发展趋势。造成食品微生物污染的因素众多，食品的生产、存贮、运输过程均有可能造成微生物污染。加强食品微生物检验力度，提高检验水平是减少食品安全问题的有效手段，本文介绍了食品微生物检验的主要内容，详细阐述了几种检验方法，旨在为食品微生物检验方法问题研究提供一些有价值的参考。
2.食品微生物检验内容
2.1污染程度指标菌
通过污染程度指标菌的检验，能够有效判定检验食品的污染程度[1]，一般是将受检食品样本经过特定处理后培养得出的单位菌落个数。
2.2大肠菌群
大肠杆菌是评估食品质量的重要指标之一[2]。由动物粪便产生，指通过温度为37℃环境下培养24小时候得出的能够产气、产水、发酵乳糖、厌氧或需氧的革兰氏染色阴性无芽孢杆菌。
2.3致病菌
对于常见菌的适量，相关食品微生物学检验标准已有明确的规定。因此，在进行食品微生物检查中除了检验污染程度指标菌和大肠菌群的数量，还要进行致病菌数量的检验，常见的致病菌有志贺氏菌、沙门氏菌、霉菌等。
3.食品微生物检验方法
3.1.抗阻检验法
抗阻检验法一般用于食品中大肠杆菌以及霉菌的检验。其基本原理为：在细菌培养过程中，对惰性物质进行分解，以此代谢出电活性物质，这些物质在游离过程中会增加培养细菌的导电性，从而改变阻抗。不同细菌产生的阻抗不同，可以此作为检测依据，对细菌进行有效检测。该检验法的优点在于：所需检验时间段、反应快速、敏感度高，且具有很强的特异性，能够重复检验，便于推广使用。
3.2.荧光分析与色谱检验法
荧光分析与色谱检验法均是通过检验微生物生长过程中存在的物理特性完成鉴定。荧光分析检验法主要有两种，一种是直接计算细菌数量，将微生物进行荧光染色处理，激光光束聚焦整形后，对受检样品进行垂直照射，经过处理的受检样品在激光的强烈照射下出现散射光，荧光也因此被激发。通过荧光的强弱进行细菌核内物质浓度或细菌膜抗原强度判定，通过散射光进行细菌体积的判定。最终计算出受检样品细菌数量。另一种的采用酶联荧光免疫分析技术，通过微生物的特意反应将受检细菌分离出来，再通过荧光的强弱进行阴性或阳性判定。色谱检验法是通过检验细菌在代谢过程中产生的饱和脂肪酸含量，从而进行微生物检验[3]。由于荧光分析与色谱检验法是通过细胞DNA、体积等物理特征进行检验，检验范围有限，只能进行真核生物的检验。且检验成本相对较高，不利于推广使用。
3.3酶联免疫吸附检验法
酶联免疫吸附检验法一般用于大肠杆菌、军团菌、沙门氏菌等细菌检验，该方法利用酶的催化作用以及抗原抗体免疫反应的特异性，将二者有机结合，形成一种检验方法。实践证明[4]，在进行沙门氏菌检验过程中，使用克隆抗体制备试剂作为检验剂，可检验出最低500cfu/g。该方法的优点在于：能够有效进行定量、定性测量，以及抗体、原体测量。但所需检验过程需要较长时间，特异性与灵敏度仍有提升的空间。
3.4.放射测量檢验法
放射测量检验法的基本原理为：在培养细菌生长过程中放入14C碳水化合物，通过细菌代谢产生 ，再使用仪器测量 变化情况，以此进行受检样品细菌鉴定。例如，在培养细菌中投入 葡萄糖，若受检样品内存在细菌，则经过细菌代谢后可能出现以下现象：(1) 葡萄糖经过细菌代谢后释放出气态 ，则通过氢氧化季铵盐收集，再使用仪器检查受检样品的细菌情况。(2) 葡萄糖被细菌吸收至体内，通过仪器检验受检样品的放射性。通过有无放射性判定有无细菌，通过放射性强弱判定细菌数量。放射测量方法是结合了多种化学、物理技术于一身的检验方法，一般用于血培养基中的细菌检验。
3.5聚合酶联反应检验法
聚合酶联反应检验法利用基因扩增进行细菌检验的一种方法，主要用于难以进行培养或根本无法培养的细菌检验。其基本原理为利用酶生物素、半抗原等标记物或其他放射性同位素进行特异核苷酸片段标记，以制作核酸探针进行细菌检验。该方法的灵敏度非常高，但是由于受检物质在进行长时间的纯化处理，对操作人员具有非常高的技术水平要求，因此难以进行推广应用。
3.6生物传感器检验法
生物传感器检验法是利用生物传感器进行微生物检验，传感器的主要组成部分有理化换能器和生物敏感元件。基本原理为：通过敏感元件与微生物产生反应，利用理化转换器进行该反应的捕获，将反应程度表达成连续的或离散的数字信号，通过信号进行受检物质检测。生物传感器检验法是生物科学、信息科学、物理科学以及化学科学等多项科学交叉结合形成的综合型技术[5]，能够快速有效分析受检物质，满足目前日益复杂的受检样品的检验需求。
生物传感器检验法主要包括以下两种：(1)生物发光传感器检验。该方法具有良好的特异性，且能够对死菌与活菌进行有效区分，逐渐被推广应用，不足之处在于检验过程所需时间过长，且灵敏度尚待提高。(2)光学传感器检验法。该方法是在传感器表面固定受检物体，通过厚度变化使光产生折射，传感器通过该变化进行细菌检验。具有成本低、操作简便、检查迅速等优点，不足之处在于检查范围受限，仅能够进行特点细菌检验，且灵敏度尚待提高。
生物传感器检验法作为一种新型的检验方法，其优势越来约得到人们的肯定，随着科技的不断发展，该检验方法得到不断的完善与进步，朝仪器微小化、功能多样化方向发展，具有非常高的推广价值以及很好的发展前景。
4.结束语
综上所述，食品微生物检验是保障食品安全的重要手段，必须引起高度重视。通过食品的微生物检验，能够有效进行食品质量控制，有助于人们提高对食品安全的信任度。食品微生物的检验方法多样，可根据检验情况选择最佳的检验方法，随着科技水平的不断提高，检验方法也在不断完善与发展，检验质量也得到了进一步提高。同时，检验人员应充分认识到自身的工作职责，严格遵守工作制度，按规定进行食品检验，以确保检验结果的准确性。
参考文献：
[1]郑幸福，杨义凤，卿玲，米斌，周良君.2006～2009年绵阳市城区学校食品卫生监测结果分析[J].预防医学论坛，2010，01(11)：107-121.
[2]邢丽萍，李萍，王文，殷晨.呼和浩特市售保健食品微生物污染状况调查分析[J].预防医学情报杂志，2010，06(09)：612-615.
[3]杨虎，向文良，张弛，孙烨琨，王璐，黄敏，孙群.培养和非培养法分析冷藏鸡肉胴体中的细菌多样性[J].微生物学通报，2010，07(10)：744-749.
[4]白梅，王娟，卿蔓君，包秋华，孙天松，张和平.内蒙古西部区酸粥中酵母菌的分离鉴定及优势菌分析[J].微生物学通报，2010，04(09)：307-310.
[5]赵贵明，杨海荣，赵勇胜，袁飞，暴书婵，陈颖.MALDI-TOF质谱技术对克罗诺杆菌的鉴定与分型[J].微生物学通报，2010，06(08)：884-887., http://www.100md.com(张天才 陈德珍 张保国)