SD大鼠海马神经干细胞体外培养与鉴定(2)
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参见附件。
3.结 果
3.1 NSCs增殖及成球
原代NSCs接种24小时后，倒置显微镜下可见，细胞数量明显增多，胞体呈圆形，透光性较好，多数细胞悬浮生长，并以单个或2个甚至几个细胞抱团生长，见图1。原代细胞接种96小时后，镜下可见散在单个悬浮细胞数量明显减少，形成许多悬浮的神经球，有的神经球直径可达到100μm左右，球体直径超过150μm，球體中央光线稍暗，表明中部的细胞营养缺乏，生长状态不是太好，神经球的体积过大不利于细胞生长，见图2。
3.2 原代神经干细胞Nestin鉴定
Nestin表达阳性，所培养细胞为神经干细胞，如图3。
3.3 NSCs体外诱导分化
神经球经胎牛血清诱导培养2h，细胞开始向外迁移，球体周边出现突出，如图4。胎牛血清诱导培养7d后，NSC基本完全分化成各种不同的神经细胞，如图5。
3.4 NSCs多向分化潜能鉴定结果
3.4.1 神经元鉴定 NSE表达阳性，表明细胞是神经元，见图6所示。
3.4.2星形胶质细胞鉴定 GFAP表达阳性，表明细胞为星形胶质细胞，见图7所示。
3.4.3少突胶质细胞鉴定 MBP表达阳性，表明细胞为少突胶质细胞，见图所8示。
4.讨 论
传统的胰蛋白酶消化组织方法分离NSCs ......
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