周 熹 邱贵兴 吴志宏 原所茂 费 琦 刘 正

    (中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院骨科，北京100730)

    青少年特发性脊柱侧凸 (adolescent idiopathic scoliosis，AIS)的发病原因及具体机制尚不清楚，多数学者认为其可能是多基因遗传病[1-5]。有文献报道钙调蛋白水平增高和进展性AIS之间有一定关联意义[6-12]，也有研究显示钙调蛋白 1基因(CALM1基因)的多态性与AIS不同亚型有一定联系[13]。与 CALM1基因一样，钙调蛋白 2基因(CALM2基因)同样参与钙调蛋白合成表达，本研究选择CALM2基因为考察对象，研究其多态性与AIS的遗传易感性之间的关系，并且对不同基因表型对AIS临床亚型之间的关联性进行了分析探讨。

    1 材料与方法

    1.1 研究对象

    采用“病例-对照”研究方法，研究对象为中国汉族人群，包括散发性青少年特发性脊柱侧凸病例组和正常对照组。病例组来自2005年10月至2008年2月北京协和医院脊柱外科病房住院的中国汉族AIS患者 (Cobb角≥30°)，男17例，女90例，年龄范围10～22岁，平均15.53±2.18岁。所有患者通过临床和影像学确诊，排除其它类型的脊柱侧凸。分别记录所有患者PUMC分型[14]资料、侧凸顶点位置以及Cobb角。对照组来自同期北京协和医院就诊的外伤、感染患者及健康查体者，排除脊柱侧凸家族史和病史。对照组男17例，女90例，年龄范围10～20岁，平均15.12±2.59岁。所有研究对象和其家长签署知情同意书，并获得中国协和医科大学临床研究伦理委员会批准。

    1.2 研究方法

    1.2.1 SNP(single nucleotide polymorphyism，单核苷酸多态性)位点选择 在美国NCBI-SNPs数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/SNP)和欧洲Ensembl-SNPs数据库 (http://www.ensembl.org/index.html)中，查找 CALM2基因的已知SNPs。根据国际人类基因组单体型图计划 (http://www.Hapmap.org)提供的基因型数据，优先选取杂合度高于10%，位于外显子区域或有错义突变的SNPs和位于3'-、5'-调控区的SNPs作为遗传标记，共选取8个SNPs，具体见表1。 ......