徐宏光章平治宋俊兴胡斌赵泉来吕坤钟民张梦莹所起凤

    (皖南医学院附属弋矶山医院 1.脊柱外科；2.中心实验室，安徽芜湖 241001)

    循环机械压力诱导下兔椎间盘退变器官模型的建立及意义*

    徐宏光1**章平治1宋俊兴1胡斌1赵泉来1吕坤2钟民2张梦莹2所起凤2

    (皖南医学院附属弋矶山医院 1.脊柱外科；2.中心实验室，安徽芜湖 241001)

    背景：力学因素是导致椎间盘退变(IDD)的重要诱因，建立力学相关性 IDD 的器官模型能为 IDD 机制的研究提供理想的模型基础。

    目的：建立兔椎间盘器官模型，并施以循环机械压力，探究循环机械压力载荷对IDD 的影响。

    方法 ：6 月龄新西兰大白兔随机分为加力组和对照组，静脉给予 1.3 ml肝素(5000 U/ml)，待肝素体内循环 5 min 后处死。无菌条件下完整取出带部分椎骨的腰段椎间盘，放入 20%胎牛血清的培养液中培养。加力组应用加力器施以 0.2 MPa 压力值，每日加压 1 次 ，每次 30 min。经 过 各 个 时 段 的 培 养后，苏 木 精-伊红(HE)染色观察椎间盘 大 体 组 织 形 态 学变化；氯化硝基四氮唑蓝(NBT)染色及 4',6-二眯基-2-苯基吲哚(DAPI)复染检测椎间盘细胞成活率；Realtime RT-PCR 和Western-blotting 检测蛋白多糖(AGN)、Ⅱ型胶原(COLⅡ)的 mRNA 和蛋白表达。

    结果：对照组和加力组培养至第 7 d的组织形态学无明显变化，培养至第 14 d均表现为组织形态学破坏，且以加力组表现更为明显。对照组培养至第 7 d 的细胞成活率及 AGN、COLⅡ表达与 0 d 相比无明显变化；对照组培养第 14 d与 0 d 比较，培养第 7 d 加力组与对照组比较，培养第 14 d加力组与对照组比较，均表现为细胞成活率明显下降，AGN、COLⅡ表达下调。

    结论：成功建立短周期兔椎间盘体外器官模型，并在此模型基础上阐明循环机械压力载荷可直接导致椎间盘退变样改变。

    器官培养；循环机械压力；椎间盘退变

    Background:The mechanical factor is the main incentive of intervertebral disc degeneration.The establishment of an in vitro organ culture model can provide a basic condition for studying the mechanism of intervertebral disc degeneration. ......