张超凡 汤一苇 林建华 张文明

    (1.福建医科大学附属第一医院骨科，福建福州 350004；2.纪念斯隆-凯特琳癌症中心检验医学系与内科学系，美国纽约)

    PCR-电喷雾电离质谱技术诊断人工关节感染*

    张超凡 汤一苇 林建华 张文明

    (1.福建医科大学附属第一医院骨科，福建福州 350004；2.纪念斯隆-凯特琳癌症中心检验医学系与内科学系，美国纽约)

    人 工 关 节 感 染(prosthetic joint infection,PJI)是关节置换术后严重的并发症，在初次人工关节置换术后的发生率为1%～2%，在人工关节翻修术后的发生率为 1%～10%[1]。虽然 PJI的总体发生率不高，但随着人工关节置换术数量的增加，PJI的病例也将逐渐增多。PJI的诊断困难、治疗方法复杂、疗效不确切，部分患者可发生关节功能的永久丧失，给社会和家庭带来巨大负担。

    国际上现有多种PJI的诊断标准，如美国肌肉骨骼 感 染 协 会(MSIS)标 准[2]、美 国 骨 科 医 师 协 会(AAOS)标准[3]以及 2013 年 8 月最新于美国 费 城 制订的假体周围感染的国际共识[4]。PJI的诊断综合了患者的临床表现、关节液白细胞计数、关节液或假体周围组织细菌培养、术中冰冻切片、血清学检查(如ESR、CRP等)，其中假体周围组织或关节液的细菌培养阳性是诊断PJI的“黄金标准”。据文献报道，传统细菌培养方法的敏感性为 50%～65%[5,6]，临床上还有很多诊断为 PJI但细菌培养阴性的病例[6,7]。另外，PJI的细菌培养方法还有一些不足之处，如部分患者术前取材困难、培养时间较长(2 周或更长)[4]，且有一定的假阳性率[7]。

    近年来，微生物分子诊断技术如多聚酶链反应技术(polymerase chain reaction,PCR)、荧光原位杂交技 术(flurorescent in situ hybridization,FISH)等 开 始应用于 PJI的研究，以PCR技术应用最多。PCR方法多 样 ，如 针 对 微 生 物 16S rRNA 的 广 谱 PCR、多 重PCR、逆转录 PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)等，可通过设计特殊引物扩增病原体核酸片段，以检测扩增产物，从而鉴定微生物[8]。传统 PCR 技术检测时间短，可获得比细菌培养更高的敏感性，逐渐成为无菌体液感染诊断的“铂金标准”，但PCR也存在假阳性率偏高、无法获取待测微生物耐药基因、操作复杂 等 缺点[5,9-11] ......