吴元刚，曾羿，李明阳，刘渊，裴福兴，沈彬

    骨质疏松是一种以骨量下降、骨显微结构破坏为特征的退行性疾病，严重危害中老年人群的生命健康[1-3]。研究证实，骨质疏松的发生发展与Ⅰ型胶原结构和含量的病理改变密切相关[4,5]。Ⅰ型胶原主要由2 条α1 链(由COLIA1基因编码)和1 条α2 链(由COLIA2基因编码)形成三螺旋纤维状结构，广泛存在于骨骼组织中[6,7]。本课题组前期的研究发现，经Tet-on 转染后的COLIA1基因在骨组织中具有靶向表达能力，能够增加成骨细胞COLIA1mRNA 表达量及Ⅰ型胶原含量，促进成骨形成[8]。因此，本研究在构建大鼠骨质疏松骨折动物模型的基础上，拟进一步研究重组Tet-onCOLIA1基因腺病毒对大鼠骨质疏松骨折愈合生物力学的影响。

    1 材料与方法

    1.1 主要实验仪器及药物

    1.1.1 实验仪器

    超净工作台(丹麦Heto-Hoten 公司)，1.0 mm 克氏针(上海医疗器械有限公司)，游标卡尺(北京仪器厂生产)，外科手术器械[上海医疗器械(集团)有限公司]，双能X 线骨密度测量仪(美国DMS 公司)，电子万能材料试验机-5967(美国Instron 公司)，Micro-CT(瑞士Scanco Medical公司)等。

    1.1.2 实验药物

    10%水合氯醛(四川大学华西医院科技园)，重组Tet-onCOLIA1基因腺病毒(上海吉凯公司)，盐酸强力霉素(美国Sigma公司)等。

    1.2 大鼠骨质疏松骨折动物模型的建立

    健康雌性SD大鼠(清洁级)40只，体重241～282 g，平均(264±10)g，购自四川达硕生物有限公司，饲养于四川大学华西校区基础动物实验中心。

    40只健康雌性大鼠按照随机数字表法分为手术组和假手术组，其中手术组36只，假手术组4只。手术组大鼠切除双侧卵巢，建立骨质疏松动物模型。假手术组大鼠仅切开皮肤，不切除双侧卵巢。

    手术组36 只大鼠切除双侧卵巢3 个月后，随机选取4只并处死，同时处死假手术组4只大鼠。收集其胫骨标本，采用双能X线测量假手术组和手术组大鼠骨密度，以证实大鼠骨质疏松模型建立成功。

    随后，将其余32 只骨质疏松大鼠用薄电锯片从胫骨中段横行切断骨干 ......