李刚，胡立新，徐昕，熊敏

    类风湿关节炎是以关节滑膜慢性炎症为主要特征的常见全身性免疫疾病[1]，临床表现为滑膜细胞肿瘤样增生、血管异常过多、炎症细胞刺激关节软骨与周围组织[2]，具有持续病变、易反复发作、致残率高的特点，是临床上难治疾病之一[3-4]。miR-146a 在维持正常细胞免疫调节中发挥重要作用，miR-146a 缺失会造成细胞免疫失衡，致使炎症细胞过多释放，损伤关节组织。研究表明，通过miR-146a 抑制TRAF6 表达，从而阻断关节损伤并减少炎症细胞释放，抑制破骨细胞的生成和骨吸收活性，以减少关节破坏[5]。有研究表明，RhoA/ROCK 通路能够改变软骨细胞，从而影响软骨细胞的形态及功能[6]。本文探究基于RhoA/ROCK 通路的miR-146a 过表达对类风湿关节炎大鼠的干预效果。

    1 材料与方法

    1.1 研究对象及实验材料

    选取40只SD 健康雄性大鼠，由吉林大学动物实验中心提供，年龄8～11 个月，平均(9.5±1.2)个月，体重218～245 g，平均(231.5±11.1)g。大鼠在相对湿度30%～36%、温度(23.5±1.3)℃的环境中喂养1 周，每日光照12 h。本研究已通过湖北医药学院附属东风医院伦理委员会批准[(2022)伦审第(10)号]。

    兔抗大鼠白细胞介素-8(interleukin 8, IL-8)、白细胞介素-17(interleukin 17, IL-17)抗体(Sigma 公司)；兔抗小鼠hs-CRP 抗体(Dako 公司)；小鼠抗大鼠GSH-Px 抗体(Invitrogen 公司)；RhoA、ROCK1、ROCK2 抗体(Abcam 公司)；兔抗腺苷酸活化蛋白激酶(adenylate activated protein kinase, AMPK)、磷酸化AMPK(phosphorylated AMPK, p-AMPK) 抗 体(Millipore 公司)；兔抗大鼠克隆叉头蛋白O3a(FoxO3a)、磷酸化FoxO3a(phosphorylated FoxO3a,p-FoxO3a)抗体(Cell Signaling公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 建模及分组

    随机选取10 只纳入正常组，不做任何处理。余下30只大鼠建立类风湿关节炎模型：参照陈璐璐等[7]研究中建模方法，并适当改动，使用Ⅱ型胶原蛋白进行造模。0.1 mol/L 冰醋酸将Ⅱ型胶原溶解之后，配制成质量浓度2 g/L 的溶液 ......