翁鉴，齐天天，魏懿浩，于斐

    骨骼肌是生物体内含量最丰富的组织之一，主要负责运动的维持、形态的维持和分泌功能的执行[1-2]。骨骼肌肉的正常结构和功能完整性依赖于神经的支配，肌细胞内正常的神经传导和神经冲动，以及肌细胞内正常的代谢过程[3-4]。越来越多的证据表明，骨骼肌受损或发育不良与多种机体的疾病状态有关，包括失神经肌萎缩、癌变恶疾、内分泌代谢系统疾病等[5-8]。骨骼肌的形成是一个多步骤及复杂的过程，包括募集生肌前体、细胞增殖、细胞融合、肌管分化等[9-11]。目前的研究认为，在骨骼肌中存在多种非编码RNA，包括长度超过 200 bp 的长链非编码RNA(long non-coding RNA, LncRNA)，参与成肌调控的过程[12-13]。在细胞质和细胞核中，研究者们相继发现了LincMD1、LincYAM1、LncMUNC、LncMyoD及LncMg 等成肌分化相关的特异性调节因子，并且通过体内体外实验，验证了其对于肌源性标志物的影响[14-17]。这些研究结果预示着，LncRNA 在机体的成肌过程中发挥着重要作用。

    图1 感染不同滴度XLOC_015548基因慢病毒的C2C12细胞

    本研究团队的前期利用小鼠的周围神经损伤后失神经腓肠肌萎缩模型，结合RNA-seq 技术，分析了骨骼肌萎缩过程转录组中LncRNA 的生物学作用。根据表达差异及表达丰度，共发现73 个LncRNA 在肌萎缩过程中具有统计学差异。其中，XLOC_015548(Lnc000280)在测序结果中表现出理想的表达丰度及最显著的表达差异[18]。因此，猜测XLOC_015548可能是肌萎缩相关的靶点之一。

    慢病毒载体是一类对多种细胞均有感染能力的病毒载体，在细胞实验中应用广泛。这类病毒能够稳定地将目的基因整合到细胞的基因序列中，从而构建子代细胞，能够稳定地表达目的基因。综上所述，鉴于LncRNA 在成肌调控中的重要作用，结合前期工作中通过RNA-seq 技术得到的结果，本研究将通过慢病毒载体技术在体外诱导XLOC_015548感染C2C12 成肌细胞，构建能稳定遗传XLOC_015548 的成肌细胞模型，为进一步探究XLOC_015548 对失神经肌萎缩等骨科相关疾病提供实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 设计 ......