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编号:13624903
DEC1基因真核表达质粒的构建及对乳腺癌细胞增殖的影响
http://www.100md.com 2016年7月15日 《中外女性健康研究》 201614
     【摘要】目的:构建DEC1真核表达载体pEGFP-N1-DEC1,探讨DEC1基因对乳腺癌细胞增殖的影响及可能机制。方法:提取人乳腺癌癌细胞MCF-7总RNA,扩增获得DEEl基因,将DEC1基因插入真核表达质粒pEGFP-N1,将成功构建的pEGFP-NI-DEC1及pEGFP-N1质粒利用PEI转染MCF-7细胞,并通过G418筛选得到稳定转染细胞系。通过Western hlot检测转染前后细胞DEE1、CyclinD1蛋白表达水平;MTT法检测转染前后MCF-7细胞增殖的变化。结果:成功构建DECl真核表达载体pEGFP-NI-DtR21;与pEGFP-N1组和空白对照组相比,pEGFP-N1-DEC1组DEC1表达明显增高(P<0.05);cyclin D1的表达明显降低(P<0.05);pEGFP-N1-DEC1组细胞增殖能力明显受到抑制。结论:过表达DEC1可抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,DEC1可能通过下调cyclin D1基因的表达从而阻止细胞周期及TGF-β信号通路而发挥作用。

    【关键词】DEC1;乳腺癌;细胞增殖

    分化型胚胎软骨发育基因1(DEC1),是一类含碱性螺旋-环-螺旋结构域的转录因子,广泛表达于多种正常组织 ......

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