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编号:1279691
脑、心脏、肝脏细胞核DNA与西宁地区早期死亡时间
http://www.100md.com 2016年4月18日 中国高原医学与生物学杂志 2016年第2期
染色,1材料与方法,2结果,3讨论
     郭长智,吴 岳

    (青海大学医学院,西宁 810001)

    脑、心脏、肝脏细胞核DNA与西宁地区早期死亡时间

    郭长智,吴 岳△

    (青海大学医学院,西宁 810001)

    目的 研究西宁地区大鼠脑、心脏和肝脏细胞核DNA的降解与死亡时间关系,为该地区推断早期死亡时间寻找新的指标。方法 将40只大鼠随机分为0、2、4、8、12、24、48、72 h八个组,断颈处死后取脑皮质、心尖、肝脏组织经福尔马林固定后用改良Feulgen染色法染色,用计算机图像分析软件测量染色图像的AOD、IOD、A、MD、PI及周长,分析死亡时间与各参数的关系。结果 随死亡时间的延长,脑皮质、心尖、肝脏组织内AOD、IOD、A、MD及周长均呈现下降趋势,PI呈上升趋势。脑和肝脏DNA死后降解较心脏快。脑、心脏及肝脏DNA各参数与死亡时间均有相关性,灰度参数中的IOD与死亡时间的相关性较AOD高,形态参数中的异形指数(PI)与死亡时间相关性较其余三个参数好。结论 大鼠脑、心脏及肝脏细胞核DNA含量变化可推断西宁地区早期死亡时间,相关指标数值具有地域性。

    死亡时间 DNA IAT

    早期死亡时间(Postmortem interval,PMI,也称死后间隔时间)推断一直是法医病理学研究的重点及难点之一。传统上利用尸僵、尸温等推断死亡时间易受法医的主观经验影响。随着研究水平的不断深入,研究者从分子水平利用计算机图像分析软件检测细胞核DNA含量的变化,通过DNA含量更加精确地推断出死亡时间。但法医工作者在实践中发现,脑、心脏及肝脏细胞核DNA含量变化虽可推断早期死亡时间,但其相关指标数值在不同地区存在差异性。本研究拟对此做相关研究,考察西宁地区脑、心脏和肝脏细胞核DNA的降解与死亡时间关系的地域性特征。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    成年健康SD大鼠40只,雌雄不限,体重(220±12)g(由青海省地方病研究防治所提供,动物合格证号:2014001),适应性饲养3 d。断颈处死大鼠,依据随机原则将其分为死后0、2、4、8、12、24、48、72 h八个组,每组5只,以死后0 h组为对照组,死后即刻以平均手术时间5 min计算。尸体保存于室内环境中,环境温度(19~21)℃、湿度(20~31)%。

    1.2 实验试剂

    甲醛、1%盐酸酒精、无水乙醇(天津市红岩化学试剂厂);二甲苯 (津市化学试剂一厂);石蜡、中性树胶(上海标本模型厂);Schiff Reagent、偏亚硫酸溶液、弱酸溶液、SO2溶液 (LEAGENE公司);苏木素、伊红(武汉博士德公司) ......

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