安玉兰，邓丽君，孙 晴，靳生艳，李青红，陈丽丽，黄宁庆，陆 川，程 蓉

    (青海大学附属医院关节科，西宁 810001)

    基质金属蛋白酶(MMPs)在糖尿病足创面皮肤的表达水平及其临床意义※

    安玉兰，邓丽君，孙 晴，靳生艳，李青红，陈丽丽，黄宁庆，陆 川，程 蓉

    (青海大学附属医院关节科，西宁 810001)

    目的 探讨基质金属蛋白酶(MMPs)在糖尿病足创面皮肤的表达水平及其临床意义。方法 免疫组织化学SP法检测8例正常皮肤组织和9例糖尿病足患者创面组织中MMP-2、MMP-8、MMP-9表达水平；ELISA法检测58例正常人和55例糖尿病足患者血清中MMP-2、MMP-8、MMP-9表达水平，分析其临床意义。结果 MMP-2在正常皮肤组织和糖尿病足创面组织中的表达无明显差异(P>0.05)，MMP-8在正常组织中的表达明显高于糖尿病足患者，差异具有统计学意义(P0.05)，血清MMP-9在糖尿病足患者中的表达明显高于正常人，差异具有统计学意义(P1 对象与方法

    1.1 研究对象

    收集青海大学附属医院2013～2014年确诊为糖尿病足的患者及正常人群作为对照组，糖尿病足患者55例，男30例，女25例，年龄48～66岁。对照组58例，男33例，女25例，年龄36～70岁。收集皮肤组织用中性甲醛固定、石蜡包埋，4 μm切片。糖尿病足患者及正常人过夜禁食10 h，清晨空腹抽取静脉血10 mL。

    1.2 试验方法

    1.2.1 试剂及仪器设备

    MMPs抗体试剂盒(北京博奥森生物技术有限公司)，二抗Sunpoly-HⅡ聚合物检测试剂盒(上海太阳生物技术有限公司)，ELISA试剂盒(美国Genlab公司)，SP免疫组织化学试剂盒、ZLI-9032浓缩型DAB显色试剂盒、DAB显色增强剂(北京中杉生物科技有限公司)，山羊血清(天津市灏洋生物制品科技有限公司)，倒置显微镜(日本Olympus公司)，Dh-cg300图像分析系统(中国大恒集团有限公司)。

    1.2.2 方法

    将所有病理组织标本的石蜡块连续切片，厚度约为4 μm，用APES防脱片胶处理的载玻片捞片后置于60 ℃的恒温烤箱内烘烤2 h以上，使组织标本与载玻片紧密黏附。组织切片经脱腊处理后在0.01 mol/L的枸橼酸盐缓冲溶液中高温高压进行抗原修复，然后按SP三步法免疫组化染色试剂盒说明书提供的实验步骤进行操作。加入的一抗浓度均为1：300。

    所有收集血液室温静置30 min ......