谢 辉，于晓涛，李 君，张爱萍，魏柏青

    (青海省地方病预防控制所鼠疫预防控制科，811602 西宁)

    胶体金在不同培养温度鼠疫FI抗原检测中遇到的问题※

    谢 辉，于晓涛，李 君，张爱萍，魏柏青※※

    (青海省地方病预防控制所鼠疫预防控制科，811602 西宁)

    目的 对比胶体金纸上色谱试验(RGICA)、反向血凝试验(RIHA)及细菌检验对于28 ℃与37 ℃鼠疫菌的敏感性及特异性。方法 28 ℃、37 ℃鼠疫菌培养24 h制备菌液与28 ℃、37 ℃的鼠疫菌感染脏器取材制成的菌悬液分别行反向血凝试验，细菌检验及胶体金纸上色谱试验。结果 37 ℃鼠疫菌悬液及37 ℃鼠疫菌感染动物制备菌悬液，胶体金、反向血凝试验及细菌检验均敏感，28 ℃及28 ℃鼠疫菌感染动物取材制备的菌悬液反向血凝试验、细菌检验敏感，胶体金不敏感。结论 在现场应用与鼠疫监测中反向血凝试验因其具有简便、快速、敏感已被列入标准，28 ℃鼠疫菌胶体金检测敏感性差，检测FI抗原缺乏的鼠疫菌株易漏诊，只能作为辅助诊断。

    胶体金 温度 鼠疫 抗原 检测 问题

    鼠疫检测通常是细菌学方法与血清学方法联合使用，鼠疫的诊断主要依据细菌培养试验和反向血凝试验。随着免疫胶体金技术日益成熟，免疫胶体金出现取代ELISA等传统检测方法的趋势。但在具体工作中我们发现，胶体金技术在检测野外自毙动物材料时存在不足，例如在2012年玉树地震灾区开展鼠疫防控监测中发现鼠疫菌培养试验及反向血凝试验阳性，而鼠疫胶体金检测FI抗原呈阴性。对此我们开展了相关研究。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    EV76标准株由青海省地方病预防控制所菌种专业实验室提供；实验动物由青海省地方病预防控制所动物中心提供；鼠疫FI抗原致敏血球(2012-1)、赫氏培养基(2012-1)由青海省地方病预防控制所自行生产；鼠疫抗原胶体金试剂盒(2012120509)由北京庄迪浩禾生物医学科技有限公司生产；细菌标准比浊管由北京生物药品检定所提供。

    1.2 方法

    用28 ℃和37 ℃的细菌菌液分别行反向血凝试验、分离细菌检验实验及胶体金纸上色谱试验，用28 ℃和37 ℃的细菌攻毒，攻毒后动物取材分别行反向血凝试验、分离细菌检验实验及胶体金纸上色谱试验。

    1.2.1 取EV76标准株接种于0.1%溶血赫氏琼脂培养基，分别置于28 ℃、37 ℃温箱 ......