李小静，刘川川，刘辉琦，刘 杰，曹学锋，吴 穹，王生兰*

    (1.青海大学医学院病理生理学教研室；2.青海大学附属医院；青海 西宁 810001)

    低氧对大鼠血清bFGF、 VEGF的表达和肺动脉超微结构的影响#

    李小静1，刘川川2，刘辉琦1，刘 杰1，曹学锋1，吴 穹1，王生兰1*

    (1.青海大学医学院病理生理学教研室；2.青海大学附属医院；青海 西宁 810001)

    目的通过研究低氧对大鼠血清bFGF、VEGF的表达和肺动脉超微结构的影响，来初步揭示肺动脉高压的形成机制。方法取30只健康雄性SD大鼠，将其随机分成六组：对照组、低氧1天组、低氧7天组、低氧14天组、低氧21天组和低氧30天组。除对照组外，其余五组大鼠分别放在低压氧舱(模拟海拔5000米)1、7、14、21、30天。取各组大鼠血清及肺动脉，运用ELISA法检测大鼠血清中bFGF、VEGF的表达量，通过透射电镜观察肺动脉超微结构。结果与对照组相比，随着低氧时间的延长，大鼠血清bFGF的表达量逐渐升高，变化具有显著性差异(P1 材料与方法

    1.1 主要试剂及仪器选择

    大鼠VEGF、bFGF ELISA试剂盒购自CUSABIO生物科技有限公司；日立H-600IV型透射电镜购自日立公司。

    1.2 实验动物分组

    健康雄性SD大鼠48只购于甘肃中医院实验动物中心(合格证号：SYXK(甘)2011-0001)。将大鼠随机分成六组，每组8只，分别为对照组、低氧1天组、低氧7天组、低氧14天组、低氧21天组和低氧30天组。对照组：饲养于青海大学医学院机能实验室(西宁，海拔2260m)；低氧组分成五组，每组8只，分别为低氧1天组、低氧7天组、低氧14 天组、低氧21天组和低氧30天组，每组低氧动物分别置于低压氧舱(模拟海拔5000米)中1、7 、14 、21 、30天，每天给予低压低氧处理20 小时。

    1.3 血清bFGF、VEGF含量检测

    用ELISA法检测血清bFGF、VEGF含量：从大鼠腹主动脉采血，室温静置2小时，离心(1000r/m)20分钟，取上层血清分装(200μL)，置-20 ℃冰箱保存。按照大鼠VEGF、bFGF ELISA试剂盒操作说明步骤执行。在酶标仪450 nm波长处测定各孔的OD值。计算样品含量的平均值。

    1.4 肺动脉超微结构观察

    用透射电镜观察肺动脉超微结构：将SD大鼠麻醉，剖开，取出新鲜肺组织，切成小块(1mm×1mm×1mm)立即投入3%戊二醛固定液中进行预固定(24小时 ......