马 兰，刘川川，周 振，宋泽青，刘 洁，格日力*

    (1.青海大学医学院高原医学研究中心，青海西宁810001;2.青海省高原医学应用基础重点实验室，青海西宁810001;3.青海大学医学院临床医学系，青海西宁810001)

    低氧性肺动脉高压(Hypoxic Pulmonary Hypertension，HPH)是高原适应生理的重要表现，而显著的肺动脉高压又是慢性肺源性心脏病和各型高原病(高原肺水肿、高原红细胞增多症、高原心脏病等)发病的重要病理生理变化之一，是一种潜在的早期高原病，且病情越重，HPH越明显。在慢性HPH形成早期，肺血管收缩是主要因素，随着缺氧时间的延长，肺血管结构重建也参与其中，低氧性肺血管结构重建(hypoxic pulmonary vascular remodeling，HPVR)是慢性HPH的重要病理生理基础。然而，目前HPH的发病机制仍不清楚。

    微小RNA(microRNA，miRNA)是一种长度只有～23nt的内源性非编码单链RNA，在动物种系发生中具有保守序列，在基因表达的调控中发挥重要作用。近年来，miRNA在肺动脉高压肺血管重塑中的作用备受关注，并且对于miRNA与HPH的研究越来越受到重视。越来越多的研究表明，miRNA有望作为肺动脉高压治疗的新靶点。miR-34a是一个有多种功能的miRNA，在许多疾病的病理生理中发挥着重要作用。最新研究显示[1]，miR-34a在多种心血管疾病中存在异常表达。还有研究报道[2]，miR-34a在干细胞分化为平滑肌细胞过程中显著升高，并发现miR-34a在促进平滑肌细胞分化中起重要作用。另有研究也已证实P53能够显著地诱导miR-34a的转录，且P53基因敲除的小鼠在低氧诱导下易发生HPH及肺血管重构[3]。

    本研究旨在观察随着HPH肺血管重建过程中肺组织miR-34a和P53基因的表达情况。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物选择

    从北京维通利华实验动物技术有限公司订购雄性SD大鼠40只，体重140～160 g(动物合格证号:11400700115390)。运回西宁后随机分为常氧对照组和低氧第1 wk组、第2 wk组和第3 wk组，每组10只。

    1.2 实验试剂及仪器选择

    Rn-miR-34a primer(MS00000224)、Rn-U6 primer(MS00033740)、P53 primer QT00193522、18sRNAPrimer(QT00199374)、miScript II RT kit、miScript SYBR Green PCR kit及QuantiFast SYBR Green PCR kit均购自Qiagen公司;Fast Quant cDNA第一链合成试剂盒购自TIANGEN公司 ......