慢性低氧对小鼠骨髓有核红细胞分化与凋亡的调控作用※
比率,1材料与方法,1动物模型制备,2骨髓单个核细胞制备,3小鼠骨髓单个核CD71+细胞比率检测,4小鼠骨髓单个核Ter119+细胞比率检测,5小鼠骨髓单个核CD71+细胞的凋亡率检测,6小鼠骨髓单个核Ter
廖 瑜,王 玮,2,冯 琳,2,汤 锋,3* ,格日力,3#(1.青海大学高原医学研究中心,青海西宁810001;2.青海大学医学院临床医学系,青海西宁810001;3.青海-犹他高原医学联合重点实验室,青海西宁810001)
高原红细胞增多症(High altitude polycythrmia,HAPC)的已知病理机制是慢性低氧刺激机体过度的红细胞增生加重器官缺氧和损伤。红系造血过程是一个动态过程,以自我更新和分化为主,主要是红系干祖细胞的增殖分化以及晚期红系的分化。其中在红系干祖细胞阶段CD34(跨膜磷酸糖蛋白)通常被认为是一个重要的标记物[1]。
CD34+HSC是初期的造血祖细胞,并且具有很高的增殖潜力[2-3]。而 CD71可以认为是早期的红系祖细胞过渡为晚期红系细胞过程中选择性高表达的一个标记物。Ter119主要标记自早幼红细胞分化至成熟红系阶段的细胞。CD71和Ter119常被用以标记红系在体内的动态成熟过程[4]。低氧条件刺激CD34+细胞的增殖并且发现BFU-E的比率也显著增高,说明低氧也能够刺激 CD34+细胞的分化[5]。洪欣等[6]在 2003年研究证实,在 1%低氧条件可以促进CD34+HSC的凋亡。目前低氧对于小鼠骨髓内CD71+和TER119+的影响尚缺乏实验数据,本研究拟做相关研究。
1 材料与方法
1.1 动物模型制备
选用雄性BALB/c小鼠(许可证号:SCXK2017-0001),随机将12只小鼠分为慢性低氧组和高海拔对照组。慢性低氧组小鼠造模参考文献于青海大学低压氧仓(模拟海拔5500米)饲养30天(以下简称低氧组)。高海拔对照组小鼠在青海西宁(海拔2260米)饲养30天(以下简称对照组)。两组小鼠取血后,采用全自动生化分析仪行血液学分析。
1.2 骨髓单个核细胞制备
依据文献[8]使用小鼠骨髓单个核细胞提取试剂盒(购自天津灏洋公司)制备小鼠骨髓的单个核细胞 ......
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