低氧抑制小鼠脾脏T淋巴细胞的免疫功能※
悬液,1材料与方法,2方法,2结果,1高原低氧促进小鼠脾脏指数的升高,2高原低氧减少小鼠脾脏T淋巴细胞数量,3高原低氧抑制小鼠脾脏T淋巴细胞增殖能力,4高原低氧对小鼠脾脏细胞分泌细胞因子存在不同影响,3讨论
胡方杰,乔丽娟,俞科贤,蒲小燕,永 胜,刘 燕,许玉珍,李积东(青海大学基础医学院,西宁810001)
观察发现,长期处于低氧环境下者机体免疫功能出现紊乱[1,2]。本研究采用模拟海拔5 000 m低氧和常氧对照条件分别饲养小鼠30天,通过测定各组小鼠脾脏指数、脾脏T淋巴细胞的数量及增殖能力和细胞培养上清液中细胞因子(IL-4、IFN-γ)的含量,初步揭示低氧对小鼠脾脏T淋巴细胞免疫功能的影响及作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料
本实验研究对象为20只健康雄性BALB/c小鼠,5~7周龄,于西安交通大学医学院动物实验中心购买[SCXK(陕)2012-003],体重(15±1)g。主要试剂和仪器:抗小鼠CD3抗体(CD3-PE)、抗小鼠CD4抗体(CD4-FITC)、抗小鼠 CD28抗体(CD28-FITC、CD28-PerCP)及抗小鼠 CD8 抗体(CD8-Per-CP)(eBioscienc公司),FBS(杭州四季青生物工程材料有限公司),红细胞裂解液、噻唑蓝、RPMI1640培养基(Solarbio公司),伴刀豆球蛋白A(Sigma公司),IL-4/IFN-γ的 Elisa试剂盒(Trut Specialty Zeal公司);低压氧舱室(中国贵州,DYC-3000),流式细胞仪(BD公司,E34297600466,美国),酶联免疫检测仪(Bio-Rad公司,Coda型,美国),CO2培养箱(Thermo公司,380系列,美国)。
1.2 方法
1.2.1 构建低氧动物模型
本实验组别有低氧组(A)和常氧对照组(C),每组10只。其中C组在平均海拔400 m的西安交通大学医学院饲养,A组在青海大学医学院高原医学研究中心模拟5 000 m海拔的低压氧舱中饲养,两组小鼠饲养条件相同,常规分笼饲养30天。
1.2.2 检测小鼠脾脏指数
称重并记录数据,给予两组小鼠0.8 mL/100 g的10%乌拉坦行腹腔麻醉,无菌剖离获取小鼠脾脏,去除脾脏表面附着的结缔组织,称重并记录数据,计算小鼠脾脏指数:即脏器指数=脾脏质量/小鼠体重×100% ......
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