刘 杰，曹成珠，纪巧荣，周义玲，韩 莹，袁周阳，张 伟

    (青海大学高原医学研究中心；高原医学教育部重点实验室；青海省高原医学应用基础重点实验室，青海大学医学院病理生理学教研室，青海 西宁 810001)

    低压低氧环境是引发各种急、慢性高原病的关键因素[1，2]，在众多的急性高原病中高原肺水肿(HAPE，high altitude pulmonary edema)发病率高、危害大。AHPH发生机制涉及血管反应、神经调控、免疫应答、生化代谢、基因表达和分子信号转导等的异常改变[3，4]。低氧应激下肥大细胞(Mast cells，MCs)活化、脱颗粒与肺水肿、肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension，PAH)形成的研究是近期研究热点，本研究拟探讨不同急性低压低氧条件(模拟不同海拔高度、低氧刺激时间)下SD大鼠肺水肿发生情况；肺MCs的变化趋势。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物的饲养

    健康SD大鼠，72只，SPF级，雄性，体重272.96±15.88 g，由江苏南京市青龙山动物繁殖场提供，许可证号：SCXK(苏)2017-0001，合格(苏州大学检测)证号：201803296。大鼠运到青海大学医学院动物饲养室[海拔2260m，通风饲养橱，清洁；22℃；12：12昼/夜交替；自由摄取标准维持颗粒饲料(北京科澳协力饲料有限公司)、水]饲养1 w后随机分组实验。动物实验遵循《实验动物管理条例(2017年修订)》。

    1.2 主要仪器和试剂选择

    低压舱(实验动物低压模拟舱，HCPⅢD800，西安富康空气净化设备工程有限公司)；HE(苏木素-伊红)染色试剂盒(717033，BASO珠海贝索生物技术公司)，TB染色试剂盒(D034，南京建成公司)，SP检测试剂盒(SP9001和SP9002，中杉金桥公司)；Tryptase 抗体(ab2378，abcam公司)，Chymase抗体(ab233103，abcam公司)；戊巴比妥钠(071025，上海泰瑞尔公司)。

    1.3 实验

    1.3.1 低压低氧实验动物分组

    大鼠随机分成三个大组(每大组N=24)：NC组(常氧对照组，海拔2260m)，H5K组(低压舱，模拟海拔5000m)，H7K组(低压舱，模拟海拔7000m)，每大组分别分成四组(每组n=6)：12 h、24 h、48 h、72 h组。各组动物用苦味酸标记后，将NC组动物置于动物饲养室(海拔2260m)，H5K、7K各组动物分别置于低压舱(分别模拟海拔5000m、7000m)12、24、48、72 h进行造模 ......