姜博璠，张耀刚，沙长青，高瑞雪，杨海山，曹得萍

    (1.青海大学医学院，西宁 810001；2.青海大学附属医院包虫病重点实验室，西宁 810001；3.桂林医学院基础医学院，桂林 541101)

    泡型包虫病几乎100%原发于肝脏，常伴有纤维组织增生和钙化。有研究发现hsa-miR-125b-5p在一些肝脏相关疾病中异常表达[1]，并在活化的肝星状细胞中表现为增加显著[2]。肝星状细胞活化又是肝发生纤维化的主要原因[3]。目前国内外关于泡型包虫病患者血清miRNA差异表达的研究方向不同。本研究试图验证hsa-miR-125b-5p在泡型包虫病患者组与健康对照组血清之间的相对表达量的差异。同时通过生物信息学的方法预测其靶基因可能参与的信号传导途径，为今后泡型包虫病分子标志物的筛选提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 血清样本

    实验用血清样本均来自青海大学附属医院包虫病样本库。血清在病人未行任何治疗时抽取(排除影响本研究结果的医疗行为)。

    1.1.2 引物

    实验所使用的引物及内参购于生工生物工程(上海)股份有限公司。引物及内参的序列见表1。

    表1 引物及内参基因的序列

    Table 1 Sequence of primers and internal reference gene

    1.1.3 主要试剂和仪器

    总RNA提取试剂盒(RNAiso Plus，Takara，Cat#9108)，反转录试剂盒(MiR-XTM miRNA First-Strand Synthesis Kit，Takara，Code.638313)，荧光定量试剂盒(TB GreenTM Premix Ex TaqTMⅡ，Takara，RR820A)；反转录PCR仪(GeneAmp?PCR System 9700，ABI) ......