华国勇，郭建琴，李 旻，张晓岩，汤 锋，李润乐

    (1.青海省人民医院，青海 西宁 810007；2.青海大学医学院，青海 西宁 810001)

    多房棘球绦虫与其他寄生虫一样通过宿主获取生命活动所必须的营养物质，其代谢脂类和氨基酸的能力有限，因此需要从外界摄入糖类作为主要的能量来源。多房棘球绦虫本身无消化道，通过体表吸收宿主环境中的葡萄糖并以糖原形式储存，以此维持自身能量代谢进行生命活动。葡萄糖作为一种极性分子它不能以自由扩散的方式通过细胞膜脂质双层结构的疏水区，多数情况下需要葡萄糖转运蛋白(GLUT)的协助[1，2]。GLUT1是目前所发现的分布最广泛的转运体，负责组织与血液间葡萄糖的转运[3]。2018年Jun Matsumoto团队[4]研究发现多房棘球绦虫摄取宿主葡萄糖的过程依赖EmGLUT1，如以葡萄糖转运蛋白为抗原，能切断多房棘球蚴能量来源从而抑制其增殖。本文拟对EmGLUT1结构进行预测，筛选其氨基酸序列中的非跨膜区域进行串联，设计序列插入到原核表达载体中用以表达及纯化，获得纯度较高的重组表位肽，为后续疫苗研究寻找有效工具。

    1.材料与方法

    1.1 材料

    pCzn1载体、Artic express表达菌株(Zoonbio)；限制性内切酶Nde I和Xba I(Takara)；IPTG和氨苄青霉素钠、质粒提取试剂盒，蛋白胨、酵母粉、DNA纯化回收试剂盒(Tiangen)；兔抗His抗体、山羊抗兔IgG抗体(Bioss)；Ni-NTA sepharose(Make Research Easy)。

    1.2 方法

    1.2.1EmGLUT1跨膜结构预测

    使用生物信息学软件TMHM(http：//www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/)和TMpred(http：//www.ch.embnet.org/software/TMPRED_form.html)对EmGLUT1蛋白进行跨膜结构在线预测。

    1.2.2 表位肽的筛选及串联设计

    根据EmGLUT1蛋白跨膜结构预测结果 ......