李 苒，刘川川，刘瑞欣，陈辛玲，丁 琦，张先平，吴鹏厚，严晓成，王生兰*

    (1.青海大学基础医学部；2.青海大学高原医学研究中心；3.青海大学临床学院)

    骨桥蛋白(Osteopont，OPN)是心血管疾病的危险因素之一，也是新近发现的潜在的治疗靶点[1]。现有研究表明，慢性缺氧使肺中OPN表达上调，而OPN可以通过多个途径来调节细胞自噬，影响肺动脉高压(PAH)的形成[2]。本文拟探讨骨桥蛋白介导细胞自噬在低氧环境下对小鼠低氧性肺动脉高压(HPH)形成的作用及机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物

    1.1.2 仪器与试剂

    低压氧舱(西安富康空气净化设备工程有限公司)，BL-420S 生物采集系统(埃德仪器国际贸易上海有限公司)，RS36型全自动染色机(常州派斯杰医疗设备有限公司)，数字切片扫描仪(济南丹吉尔电子有限公司)，透射电子显微镜(日本JEOL公司)；OPN抗体(美国Abcam公司)，Beclin-1一抗、LC3B一抗、p38MAPK抗体、PI3K抗体、NF-κB抗体(美国Abcam公司)，辣根酶标记山羊抗兔二抗(武汉爱博泰克生物科技有限公司)；SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)。

    1.2 方法

    1.2.1 小鼠的分组及处理

    将小鼠分为常氧对照组(n=7)、常氧合并OPN-/-组(n=7)、低氧对照组(n=7)、低氧合并OPN-/-组(n=7)。低氧组置低压氧舱(模拟海拔5000m)28 d。常氧组饲养21 d后取材，低氧组饲养28 d后取材。

    1.2.2 小鼠肺动脉压的测定

    向腹腔内注射4%水合氯醛(0.1mL/10g)，用镊子轻夹小鼠的脚趾，无反应表示进入深度麻醉状态。小鼠仰卧固定于鼠台，沿颈部正中切口，分离出右侧颈外静脉，将聚乙烯微导管从右颈外静脉插入右心室或肺动脉，另一端连接在BL-420S生物压力传感器上，描记5 min的肺动脉压曲线。

    《意见》按照“河长负责、分工协作；统筹兼顾、分步实施；建管并重、强化管理；上下联动、协调配合；属地为主、以奖代补”五个基本原则，提出了2013年、2015年和2020年三个阶段管理目标以及加强截污治污和水资源保护、加强堤岸水面保洁和违章建筑清理、加强河道绿化和景观建设、建立长效管理机制四项主要任务。

    1.2.3 小鼠右心室肥厚指数的测量

    以脱臼法处死动物后 ......