SNRPA1基因在胃癌中的表达及对胃癌细胞生长的作用※
培养基,差异,1材料与方法,1主要材料,仪器,2方法,2结果,1高通量联合筛选结果,2SNRPA1基因在胃癌中的表达水平,转录水平及分子相互作用机制,3SNRPA1基因在6株胃癌细胞系中的表达,4特征基因
陈思嫒,孙静薇,刘 雅,安 娟,苏占海(青海大学医学院基础医学部,中藏药抗肿瘤基础与应用研究实验室,青海 西宁 810016 )
最新的研究认为[1],剪接体与癌症进展相关。SNRPA1(small nuclear ribonucleoprotein polypeptide A 1)作为主要剪接体成分—U2核小核糖核蛋白(U2 small nuclear ribonucleo protein,U2 snRNP)复合体的重要剪接因子,在剪接体的组装、获取和维持方面起重要作用[1]。SNRPA1在胃癌发生发展中的作用尚不明确。在前期实验中,我们结合TCGA分析胃癌差异表达谱发现SNRPA1在胃癌中高表达,进一步通过高通量差异基因增殖筛选技术(High Content Screening,HCS)发现干扰SNRPA1基因可以抑制胃癌细胞的生长。因此我们提出剪接体相关蛋白SNRPA1可能会影响胃癌细胞表达的假设,拟通过生物信息学及肿瘤细胞生物学实验分析、探讨SNRPA1在胃癌发生发展中的作用。
1 材料与方法
1.1 主要材料、仪器
胃癌细胞系NCI-N87、MKN-74、MKN-45、HGC-27、KATO III、AGS(由北京肿瘤医院肿瘤分子学实验室惠赠),胎牛血清(ExCell Bi0),1%青霉素-链霉素混合液(Solarbio),DMEM基础高糖培养基(Procell),胰蛋白酶-EDTA消化液(Solarbio),嘌呤霉素(Solarbio),总RNA提取试剂盒(TIANGEN),FastKing gDNA Dispelling RT SuperMix(TIANGEN),SuperReal PreMix Color(TIANGEN),CCK-8试剂溶液(Elabscience),PBS(Solarbio),4%多聚甲醛(Leigen),吉姆萨染液(Solarbio)。
NanoDrop 2000紫外分光光度计(Thermo),实时荧光定量PCR仪(Thermo) ......
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