软膏剂制备及含量测定的研究进展分析
【摘要】目的：分析软膏剂制备及含量测定的研究价值。方法：选择2017年6月-2017年12月作为研究时间段，以黄连素﹕凡士林比例1﹕10制成软膏，并选择Acclaim SEC-300(4.6×300mm，5.0μm)，流动相为乙腈-0.1%磷酸(25：75)，流速1.00ml/min，检测波长均为270nm，柱温30℃，分析液相色谱法检测黄连素。结果：本次研究中，黄连素线性范围(0.0211-0.2115)μg/mL，r值0.9994；精密度试验所得平均峰面积为266.13mAu×min，RSD为1.65%；重复性试验中黄连素检测含量分别为1.22mg/g，RSD为1.40%；稳定性试验检测黄连素峰面积RSD为0.69%，加样回收率为99.99%。结论：黄连素软膏制备方法操作便捷，采用高效液相色谱法测定黄连素能够获得良好线性关系，重复性及精密度均较好，可保证软膏质量。
【关键词】软膏；黄连素；制备；高效液相色谱法；测定
[中图分类号]R9[文献标识码]A[文章编号]2096-5249(2018)04-113-02
黄连素，通常又被称作盐酸小檗碱，属于异喹啉类生物碱，药理活性较强，以抗炎为主要药理作用，但大量临床实践证实，黄连素在治疗心血管疾病、抗肿瘤、调节免疫系统疾病及降糖方面具有重要的临床作用，而且多与其他药物组成复方制剂，或多在中成药内被检出，这表明黄连素应用范围广泛。中药成分软膏主要是指将中药粉末与软膏基质混合后制成的外用制剂，在实现中药透皮起效治疗目的的同时，体现保护创面及润肤等功效，由于软膏能够直接抵达皮肤病灶，而且携带使用方便，因此应用率逐年提高[1]。选择2017年6月-2017年12月作为研究时间段，制备黄连素软膏后，经高效液相色谱法检测黄连素含量，获得一定研究成果，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 材料与设备 本次研究主要检测材料及设备如下：(1)Dionex Ultimate3000(Thermo Scientific制造)型色譜仪；(2)采用Acclaim SEC-300(4.6×300mm，2.5μm)，检测柱温为30℃；(3)浓度测量仪器为Nanodrop2000(Thermo Scientific制造)；(4)离心机为Thermo Legend Micro17离心机；(5)20μL环形Nano Viper/彩色PEEK管(内部直径为0.18mm)；(6)震荡搅拌机，Mettler toledo 320 pH计；(7)HPLC梯度级水(Fisher Scientific制造，英国)；(8)超声波清洗器KQ-800GKDV(上海精密仪器仪表有限公司)；(9)岛津AUW120D半微量分析天平；(10)天津津腾GM-0.33A(无油)隔膜真空泵；(11)Kertone专用纯水水箱及纯水柱，湖南科尔顿水务有限公司；(12)黄连素，含量97%，陕西慧科植物开发有限公司；(3)对照品盐酸小檗碱来自南昌贝塔生物科技有限公司。
1.2 方法
1.2.1黄连素软膏制备 取黄连素10g、凡士林100g；凡士林预先加热至熔化状态，过滤降温后呈半凝状态，逐步加入黄连素，混匀后，待冷凝后可见外观细腻，呈棕黄或棕褐色，且易于涂布。
1.2.2黄连素溶液制备 精密测量黄连素软膏0.25g，置于锥形瓶内，加入甲醇25ml后混匀，经超声提取后在室温条件下静置；待发现已冷却至室温，加入适量盐酸甲醇(比例1：100)，补充丢失混合液重量，震荡滤液后，获取0.45μ滤膜滤液；分别精确称量对照品盐酸小檗碱，与盐酸甲醇(比例1：100)混合经微孔滤膜过滤后制成供试溶液，其中微孔滤膜规格0.22μm。
1.2.3黄连素检测 精密称量联合供试溶液1、2、4、8，按照2.10、4.20、8.03、16.50μg/ml浓度，加入盐酸甲醇，震荡混匀，送入液相色谱仪内，另连续进样5次，每次进样20μL，分析精密度、重复性及稳定性。
2 结果
本次研究中，黄连素线性范围(0.0211-0.2115)μg/mL，r值0.9994；精密度试验所得平均峰面积为266.13mAu×min，RSD为1.65%；重复性试验中黄连素检测含量分别为1.22mg/g，RSD为1.40%，详见表1；稳定性试验检测黄连素峰面积RSD为0.69%，加样回收率为99.99%，详见表2。
3 讨论
3.1 高效液相色谱法 液相色谱法是一类具备检测效率高、准确率高、适用范围较广、重复性较好、操作便捷等优势的检测方法，在中药及西药检测分析试验中应用范围较广，比如经典液相色谱、高效液相色谱法等。以高效液相色谱法为例，目前多应用于药物有效成分、药品质量把控试验中，现已成为鉴定中药材、评估药品质量的重要手段之一，有助于医疗机构、制药企业把控药品质量，从而保障临床用药安全[2-3]。
3.2 黄连素软膏制备与检测 黄连素在临床上应用范围比较广泛，最初由中药黄连中提纯，但目前因作用广泛，临床用量较大，故目前多为人工合成药物。黄连素多用于霍乱弧菌属细菌、志贺菌属细菌等致病菌导致的感染性肠道疾病，但对于烧伤、肿瘤、非酒精性脂肪肝、糖脂代谢异常等疾病同样具有良好的抗炎或抑制效果[4-5]。黄连素检测方法较多，如紫外-可见分光光度法、二阶导数光谱法、薄层扫描法及高效液相色谱法等，其中以高效液相色谱法应用率最高，该方法具有重复性好、层析速度快、分离效率高、特异性较好等优势，在药物分析中应用范围广泛。本次研究以黄连素及凡士林为原材料制成黄连素软膏后通过高效液相色谱进行检测，结果显示，黄连素软膏外观细腻，呈棕黄或棕褐色，且易于涂布，制备过程简单易于操作，检测后显示黄连素线性范围(0.0211-0.2115)μg/mL，r值0.9994；而且重复性及精密度均较好。
总之，利用黄连素及凡士林制成黄连素乳膏具有操作便捷、吸收较好等优点，而且HPLC法检测后提示重复性及精密度均较好。
参考文献：
[1]张琴.防茄软膏的制备及质量控制研究[J].中国当代医药， 2016， 23(8)： 15-17， 27.
[2]孙建华.HPLC法测定薄荷苯酚软膏中苯酚含量[J].实用医药杂志， 2015， 32(1)： 78-79.
[3]王闰， 孟慧， 许勇.复方甘草软膏的制备及含量测定法的建立[J].东南国防医药， 2015(4)： 389-392.
[4]高慧珠.黄连素的药理作用及研究分析[J].医学信息， 2016， 29(34)： 274-275.
[5]刘晓琰.复方黄连及黄连素的临床应用及研究新进展[J].社区医学杂志， 2015， 13(6)： 63-64., http://www.100md.com(王柳云)
【关键词】软膏；黄连素；制备；高效液相色谱法；测定
[中图分类号]R9[文献标识码]A[文章编号]2096-5249(2018)04-113-02
黄连素，通常又被称作盐酸小檗碱，属于异喹啉类生物碱，药理活性较强，以抗炎为主要药理作用，但大量临床实践证实，黄连素在治疗心血管疾病、抗肿瘤、调节免疫系统疾病及降糖方面具有重要的临床作用，而且多与其他药物组成复方制剂，或多在中成药内被检出，这表明黄连素应用范围广泛。中药成分软膏主要是指将中药粉末与软膏基质混合后制成的外用制剂，在实现中药透皮起效治疗目的的同时，体现保护创面及润肤等功效，由于软膏能够直接抵达皮肤病灶，而且携带使用方便，因此应用率逐年提高[1]。选择2017年6月-2017年12月作为研究时间段，制备黄连素软膏后，经高效液相色谱法检测黄连素含量，获得一定研究成果，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 材料与设备 本次研究主要检测材料及设备如下：(1)Dionex Ultimate3000(Thermo Scientific制造)型色譜仪；(2)采用Acclaim SEC-300(4.6×300mm，2.5μm)，检测柱温为30℃；(3)浓度测量仪器为Nanodrop2000(Thermo Scientific制造)；(4)离心机为Thermo Legend Micro17离心机；(5)20μL环形Nano Viper/彩色PEEK管(内部直径为0.18mm)；(6)震荡搅拌机，Mettler toledo 320 pH计；(7)HPLC梯度级水(Fisher Scientific制造，英国)；(8)超声波清洗器KQ-800GKDV(上海精密仪器仪表有限公司)；(9)岛津AUW120D半微量分析天平；(10)天津津腾GM-0.33A(无油)隔膜真空泵；(11)Kertone专用纯水水箱及纯水柱，湖南科尔顿水务有限公司；(12)黄连素，含量97%，陕西慧科植物开发有限公司；(3)对照品盐酸小檗碱来自南昌贝塔生物科技有限公司。
1.2 方法
1.2.1黄连素软膏制备 取黄连素10g、凡士林100g；凡士林预先加热至熔化状态，过滤降温后呈半凝状态，逐步加入黄连素，混匀后，待冷凝后可见外观细腻，呈棕黄或棕褐色，且易于涂布。
1.2.2黄连素溶液制备 精密测量黄连素软膏0.25g，置于锥形瓶内，加入甲醇25ml后混匀，经超声提取后在室温条件下静置；待发现已冷却至室温，加入适量盐酸甲醇(比例1：100)，补充丢失混合液重量，震荡滤液后，获取0.45μ滤膜滤液；分别精确称量对照品盐酸小檗碱，与盐酸甲醇(比例1：100)混合经微孔滤膜过滤后制成供试溶液，其中微孔滤膜规格0.22μm。
1.2.3黄连素检测 精密称量联合供试溶液1、2、4、8，按照2.10、4.20、8.03、16.50μg/ml浓度，加入盐酸甲醇，震荡混匀，送入液相色谱仪内，另连续进样5次，每次进样20μL，分析精密度、重复性及稳定性。
2 结果
本次研究中，黄连素线性范围(0.0211-0.2115)μg/mL，r值0.9994；精密度试验所得平均峰面积为266.13mAu×min，RSD为1.65%；重复性试验中黄连素检测含量分别为1.22mg/g，RSD为1.40%，详见表1；稳定性试验检测黄连素峰面积RSD为0.69%，加样回收率为99.99%，详见表2。
3 讨论
3.1 高效液相色谱法 液相色谱法是一类具备检测效率高、准确率高、适用范围较广、重复性较好、操作便捷等优势的检测方法，在中药及西药检测分析试验中应用范围较广，比如经典液相色谱、高效液相色谱法等。以高效液相色谱法为例，目前多应用于药物有效成分、药品质量把控试验中，现已成为鉴定中药材、评估药品质量的重要手段之一，有助于医疗机构、制药企业把控药品质量，从而保障临床用药安全[2-3]。
3.2 黄连素软膏制备与检测 黄连素在临床上应用范围比较广泛，最初由中药黄连中提纯，但目前因作用广泛，临床用量较大，故目前多为人工合成药物。黄连素多用于霍乱弧菌属细菌、志贺菌属细菌等致病菌导致的感染性肠道疾病，但对于烧伤、肿瘤、非酒精性脂肪肝、糖脂代谢异常等疾病同样具有良好的抗炎或抑制效果[4-5]。黄连素检测方法较多，如紫外-可见分光光度法、二阶导数光谱法、薄层扫描法及高效液相色谱法等，其中以高效液相色谱法应用率最高，该方法具有重复性好、层析速度快、分离效率高、特异性较好等优势，在药物分析中应用范围广泛。本次研究以黄连素及凡士林为原材料制成黄连素软膏后通过高效液相色谱进行检测，结果显示，黄连素软膏外观细腻，呈棕黄或棕褐色，且易于涂布，制备过程简单易于操作，检测后显示黄连素线性范围(0.0211-0.2115)μg/mL，r值0.9994；而且重复性及精密度均较好。
总之，利用黄连素及凡士林制成黄连素乳膏具有操作便捷、吸收较好等优点，而且HPLC法检测后提示重复性及精密度均较好。
参考文献：
[1]张琴.防茄软膏的制备及质量控制研究[J].中国当代医药， 2016， 23(8)： 15-17， 27.
[2]孙建华.HPLC法测定薄荷苯酚软膏中苯酚含量[J].实用医药杂志， 2015， 32(1)： 78-79.
[3]王闰， 孟慧， 许勇.复方甘草软膏的制备及含量测定法的建立[J].东南国防医药， 2015(4)： 389-392.
[4]高慧珠.黄连素的药理作用及研究分析[J].医学信息， 2016， 29(34)： 274-275.
[5]刘晓琰.复方黄连及黄连素的临床应用及研究新进展[J].社区医学杂志， 2015， 13(6)： 63-64., http://www.100md.com(王柳云)