1.5实时荧光定量PCR 用于检测Wnt信号通路下游基因Axin2的表达。收集处理后的细胞，Trizol裂解，RNA提取试剂盒提取总RNA，Nano Drop测定RNA的浓度，逆转录得到cDNA，然后进行qPCR(参照Takara试剂盒说明书)。

    1.6Western b10±检测 蛋白BCA蛋白定量试剂盒检测样品的浓度，计算上样量。取一定量蛋白与5x蛋白上样缓冲液混匀，置于100℃金属浴中处理5min，配制10%分离胶和5%浓缩胶，进行电泳。电泳条件：80V，30min，120V至溴酚蓝进入浓缩胶底部。转膜条件：130mA，90-120min。5%BSA于TBST封闭2h，一抗4℃过夜孵育。TBST洗膜3次，5min/次，孵二抗，常温1h，TBST洗膜3次，5min/次，显影。

    1.7HUVEC细胞培养及分组 HUVEC生长于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，置于37℃、5%CO2培养箱内培养，细胞贴壁并长至70%～80%时，用0.05%胰蛋白酶消化传代。HUVEC生长至传代融合度后，分别用lng/mL，3ng/mL，10ng/mL，30ng/mL ......