姚鲁清,崔宝龙,何晓燕,赵芳,周畅

    (青岛大学附属医院神经内科,山东 青岛 266003)

    肌萎缩侧索硬化(ALS)是一种累及上、下运动神经元的进行性神经系统变性病[1]，可以导致延髓、躯体部肌肉萎缩[2-3]。约90%的ALS病例是散发性的，只有10%的ALS病例为家族性的[4-5]。目前还没有有效的治疗方法可以阻止疾病进展。美国食品药品监督管理局(FDA)目前仅批准利鲁唑和依达拉奉作为有效延缓病程的药物[6]。有研究证实，家族性ALS中部分病人的发病与超氧化物歧化酶1(SOD1)基因突变有关[5,7]，还有一部分病人发病与TARDBP基因突变有关。目前认为TARDBP基因的突变可以导致异常TDP-43蛋白聚集而致病[7-9]。最新研究表明，TDP-43是ALS的病理性标志物。BRETTSCHNEIDER等[10-11]发现，异常聚集TDP-43在体内沉积具有病理特征性，从而提出4阶段分期，进一步突出了TDP-43在疾病进展中的作用。研究表明，百草枯(PQ)可以诱导SH-SY5Y细胞产生异常聚集的TDP-43蛋白[12]。

    自噬是一种细胞进行自我吞噬的过程，更是清除细胞错误折叠蛋白质的关键机制。影响细胞自噬机制的主要是饥饿状态[13]、细胞凋亡[14]和某些药物[15]等。细胞自噬异常，可使异常或错误折叠的蛋白质聚集在细胞质、细胞核中，从而导致细胞器损伤及神经元功能障碍[16]。通过调节自噬可以减少神经变性病中的异常蛋白质聚集。天然小分子生物碱的调节自噬作用已经被广泛探究[15]。柯诺辛碱B(Cory B)作为一种天然小分子生物碱在帕金森病模型中可激活自噬、减少α突触核蛋白的表达[17]。但是，Cory B在ALS模型中的作用尚无明确的研究。故本研究用PQ处理细胞制备ALS模型，探讨Cory B是否可以通过调节自噬而发挥神经保护作用，以期为治疗ALS提供新方向和新思路。

    1 材料与方法

    1.1 药品与试剂

    所用Cory B购于MCE公司；PQ购于Sigma-Aldrich公司；SH-SY5Y细胞购于American Type Culture Collection公司；细胞培养耗材购于Corning公司；胎牛血清购于BI公司；所有抗体均购于Cell Signaling Technology公司；LC3B购于Abcam公司 ......