激活CB2受体对MPP+诱导BV2小胶质细胞iNOS和Arg-1表达的影响
抗炎,表型,1材料和方法,1实验材料,2细胞培养及分组,3免疫印迹法检测iNOS和Arg-1蛋白的表达,4统计学分析,2结果,1JWH133对MPP+处理的小胶质细胞iNOS蛋白表达的
王梦雅,刘曼,马泽刚(青岛大学基础医学院生理学教研室,山东 青岛 266071)
帕金森病(PD)是一种以中脑黑质多巴胺能神经元进行性退化为特征的神经退行性疾病[1]。神经炎症是PD的主要病理因素之一,小胶质细胞是参与调节神经炎症的重要细胞[2]。研究表明,小胶质细胞分为经典激活型(M1型)和选择性激活型(M2型)[3]。M1型小胶质细胞持续产生促炎递质,如诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)等[4];M2型小胶质细胞分泌抗炎因子和神经营养因子,如精氨酸酶-1(Arg-1)、脑源性神经营养因子(BDNF)等[5]。因此,有效调控小胶质细胞的表型状态,可能成为未来治疗PD的新策略。
近些年研究表明,大麻素Ⅱ型受体(CB2受体)主要分布在小胶质细胞上,激活CB2受体可以抑制小胶质细胞的激活,进而调节神经炎症[6-7]。有研究报道,激活CB2受体可调节小胶质细胞M1/M2极化,进而减轻出血性脑病的脑损伤[8]。然而,激活CB2受体对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理的小胶质细胞表型影响目前尚不清楚。本研究应用MPP+处理BV2小胶质细胞建立体外PD模型,观察CB2受体激动剂JWH133对MPP+诱导的BV2细胞不同表型标志物iNOS和Arg-1表达的影响,以及CB2受体拮抗剂AM630的阻断效应。
1 材料和方法
1.1 实验材料
BV2小胶质细胞购于中国科学院上海细胞库;DMEM高糖培养液和胎牛血清购自以色列Biological Industries(BI)公司;青霉素/链霉素溶液购自索莱宝公司;MPP+、CB2受体激动剂JWH133和CB2受体抑制剂AM630购自美国Sigma-Aldrich公司;兔抗iNOS和β-actin抗体购自美国Proteintech公司;兔抗Arg-1抗体购自美国Cell Signaling公司;HRP标记山羊抗兔IgG购自中国爱必信公司;ECL发光液购于中国雅酶公司 ......
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