李红玲，李 敏，石京山，孙黔云

    (1.遵义医学院药理学教研室，贵州遵义 563099;2.贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵州贵阳550002;3.贵州省人民医院呼吸疾病研究所，贵州贵阳 550002)

    血管内皮细胞是血管平滑肌与血液的生理屏障，具有重要的生理调节功能和分泌功能，与诸多疾病的发生、发展有密切的关系[1]。一系列病理生理刺激因素会导致内皮细胞的活化和损伤，致使内皮细胞功能紊乱。在诸如动脉粥样硬化等病征中，氧化应激损伤是重要的诱因[2-4]。近年来抗氧化应激损伤成为临床治疗相关疾病和新药研究的重要策略。他汀类药物是目前临床上普遍使用的降血脂药。最新研究表明他汀类药物还具有保护内源性抗氧化酶活性的作用[5-6]。既往研究多采用H2O2损伤脐静脉内皮细胞和ECV304来研究他汀类药物的保护作用，而阿托伐他汀钙对H2O2致人微血管内皮细胞损伤的影响作用仍不清楚。为探讨和评价阿托伐他汀钙对氧化应激损伤人微血管内皮细胞的保护作用，本文进行了阿托伐他汀钙对H2O2致内皮细胞损伤的保护作用研究，旨在为临床相关疾病的防治提供参考依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料 人微血管内皮细胞株HMEC由本实验室传代培养;RPMI1640培养基为GIBCO公司产品;胎牛血清(fetal bovine serum，FBS)购自天津灏洋生物;过氧化氢(H2O2)、四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium，MTT)、阿托伐他汀钙(atorvastatin calcium，ATV)购自sigma公司;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)试剂盒为南京建成生物研究所产品;人P-selectin和ICAM-1 ELISA试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司;其余试剂均为符合实验要求的进口或国产试剂。

    1.2 仪器 Forma 3111型CO2培养箱(美国Thermo公司);Milli Q超纯水系统和Elix纯水系统(美国Millipore公司);Nikon TS100倒置相差显微镜(日本Nikon公司);Molecular Devices Spectra MAX-190连续波长酶标仪(美国MD公司);5810R冷冻离心机(德国Eppendorf公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 HMEC培养 人微血管内皮细胞株HMEC由本实验室传代培养，用含20%胎牛血清的RPMI1640培养基在37℃，5%CO2饱和湿度培养箱内培养，取对数生长期细胞进行实验 ......