丹参酮ⅡA对ApoE基因敲除小鼠肝脏脂质沉积的影响及机制
空白对照,1材料,2方法,3结果,4讨论
王俊岩,朱美林,冷 雪,马佳会,杨 祎,邵楚茜,贾连群(辽宁中医药大学省部共建教育部重点实验室, 辽宁 沈阳 110032)
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是导致心脑血管疾病的主要病理基础。载脂蛋白E (apolipoprotein E, aopE)主要存在于极低密度脂蛋白(very low density lipoprotein, VLDL)、乳糜微粒(chylomicrons,CM)和部分高密度脂蛋白 (high density lipoprotein receptor, HDL)中,参与甘油三酯(triglyceride,TG)和胆固醇的转运,通过低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor, LDL-R)途径和非LDL-R途径发挥降低血浆中TG、总胆固醇(total cholesterol, TC)水平的作用。AopE基因缺失小鼠,由于apoE依赖的LDL-R途径和非LDL-R途径受阻,导致TG、TC、LDL和 VLDL 水平升高进而诱发AS发生[1-2]。
丹参酮ⅡA为唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge)的干燥根及根茎的主要脂溶性成分之一。现代药理学研究表明丹参酮ⅡA能抑制内源性胆固醇的合成,降低氧化低密度脂蛋白(LDL)的生成,能有效抑制AS形成[3]。本研究通过观察丹参酮ⅡA对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠肝脏脂质沉积的影响及可能机制,为该类药物在临床上通过降脂防治AS相关疾病提供实验依据。
1 材料
1.1 实验动物 20只ApoE-/-小鼠,6~8周龄,雌雄各半,体重18~20 g。同龄具有相同遗传背景的C57BL/6J小鼠10只。购于北京大学实验动物中心,合格证号为[SCXK(京)2011-0012],饲养于辽宁中医药大学实验动物中心,SPF级,自由饮水与摄食。
1.2 试剂与仪器 Trizol、RT-PCR试剂盒、琼脂糖购自大连TaKaRa公司;HE染色液购自北京鼎国生物技术公司;兔抗小鼠LDL-R、LCAT单克隆抗体购自Abcam公司;TG、TC、HDL-C、LDL-C测定试剂盒购自四川迈新生物技术有限公司。丹参酮ⅡA购自中国药品生物制品检定所。荧光显微镜,德国Leica;PCR仪,美国伯乐;全自动生化分析仪,日本东芝 ......
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