李春梅

    (山东省临沂市中医院，山东 临沂 276000)

    脑出血是临床常见急重症之一，具有较高的死亡率和致残率。在我国，脑出血发病率占脑卒中的比例远高于西方国家[1]，且脑出血患者1个月内病死率超过40%，大多数幸存者常遗留严重的神经功能缺损[2]。目前尚没有治疗脑出血的肯定、有效的措施。应用较多的治疗手段是微创血肿清除术，及重组组织型纤溶酶原激活物的药物治疗[3]，且目前对于脑出血的基础研究远落后于疾病发展。充分利用我国丰富的中草药资源，从中发现对脑出血有防治作用的中药有效成分具有重要意义。本研究采用阿托伐他汀制备转基因斑马鱼颅内出血模型，观察中草药淫羊藿的主要有效成分淫羊藿苷(icariin, ICA)对该模型的保护作用，为淫羊藿苷用于临床防治脑出血提供基础药理学依据。

    1 材料

    淫羊藿苷(南京替斯艾么中药研究所，经HPLC测定其纯度≥96%)；荧光显微镜(Leica荧光显微镜，德国Leica公司)；所用试剂均为分析纯；所用斑马鱼为Tg(fli-1:EGFP);Tg(gata1:DsRed)双转基因斑马鱼从斑马鱼国际资源中心(Oregon, PO)购买。

    2 方法

    2.1 斑马鱼的饲养 斑马鱼饲养在28 ℃反渗水，光照按14 h日光和10 h无光为周期，每天早上9∶00开始光照，每日以丰年虾及热带鱼粮于早上及下午喂饲两次。

    2.2 斑马鱼胚胎的收集 于受精后4 h(hours post fertilization, 4 hpf)淘汰掉未受精及发育不健全的胚胎 ......