清胰Ⅱ号对雨蛙素诱导的急性胰腺炎小鼠Nrf2相关基因水平的影响
淀粉酶,空白对照,2结果,3讨论
柳 源,刘龙中,徐亚沙,谢雪励,李利生,徐尚福,陆远富,吴 芹,石京山(1. 遵义医学院 基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室,贵州 遵义 563099;2. 遵义医学院附属医院 药剂科,贵州 遵义 563099;3. 遵义医学院 药学院,贵州 遵义 563099)
基础医学研究
清胰Ⅱ号对雨蛙素诱导的急性胰腺炎小鼠Nrf2相关基因水平的影响
柳 源1,刘龙中2,徐亚沙1,谢雪励3,李利生1,徐尚福1,陆远富1,吴 芹1,石京山1
(1. 遵义医学院 基础药理教育部重点实验室暨特色民族药教育部国际合作联合实验室,贵州 遵义 563099;2. 遵义医学院附属医院 药剂科,贵州 遵义 563099;3. 遵义医学院 药学院,贵州 遵义 563099)
目的 研究清胰Ⅱ号对雨蛙素所致小鼠急性胰腺炎的保护作用及其机制。方法 雄性昆明种小鼠32只,随机分为空白对照组、模型组、清胰Ⅱ号低剂量组(10 g/kg)及清胰Ⅱ号高剂量组(20 g/kg),每组8只。给药7 d后,采用雨蛙素制模。观察清胰Ⅱ对胰腺指数、血清胰淀粉酶含量、胰腺组织的形态学变化及胰腺组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、醌氧化还原酶(NQO1)、血红素加氧酶(HO-1)、谷胱甘肽合成的限速酶(Gclc)基因的mRNA 水平的影响。结果 与空白组比较,模型组胰腺指数及血清胰淀粉酶水平显著升高(P1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 药品及试剂 清胰Ⅱ号(遵义医学院附属医院提供,大黄40 g,赤芍40 g,芒硝10 g,木香15 g,延胡索15 g,厚朴15 g,牡丹皮15 g,栀子15 g,方剂水煎1次,去渣取汁,4 ℃存储);RNA提取试剂盒、RNA纯化试剂盒(上海华舜生物技术有限公司);引物设计(大连宝生物工程有限公司);High Capacity Reverse Transcriptase Kit (Applied Biosystems, USA);SYBR?PCR Master Mix (美国BIO-RAD公司);胰蛋白酶测试盒(南京建成生物工程研究所);雨蛙素(美国sigma公司),其他试剂均为国产分析纯。
1.1.2 动物 雄性昆明种小鼠32只, SPF级,体重(20±5) g,由重庆第三军医大学大坪医院实验动物中心提供,许可证号SCXK(军)2012-0011。
1.1.3 仪器 5417R型冷冻离心机(德国eppendorf);RO.DI-50(H)-RZ型纯水器(Research科技仪器公司);BS100S型电子分析天平(北京德赛公司);X-15R型冷冻离心机(美国Beckman);SIM-F124型制冰机(日本三洋公司);CFX connect荧光定量PCR仪(美国BIO-RAD);ND2000超微量分光光度计(美国Thermo);Trilogy全自动生化分析仪(美国Drew);BX43型正置光学显微镜(日本Olympus);Mastercycler Gradient 梯度PCR仪(德国Eppendorf公司)等 ......
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