绿原酸对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用
存活率,试剂盒,2结果,3讨论
林 茂,王 敏,刘 芳,罗小金,高仕琴,王春梅(遵义医学院珠海校区 珠海市重点实验室暨中药基础及应用研究实验室,广东 珠海 519041)
基础医学研究
绿原酸对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤的保护作用
林 茂,王 敏,刘 芳,罗小金,高仕琴,王春梅
(遵义医学院珠海校区 珠海市重点实验室暨中药基础及应用研究实验室,广东 珠海 519041)
目的 探讨绿原酸(CGA)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法 采用Aβ25-35诱导PC12细胞构建细胞损伤模型,并用3个不同浓度的CGA分组干预。CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;比色法检测细胞丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;Western blot检测细胞核转录因子κB(NF-κB)和白细胞介素1β(IL-1β)表达;ELISA法检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。结果 与Control组比较,Model组细胞存活率下降、凋亡率升高,SOD和GSH-Px活力降低、MDA水平升高,NF-κB、IL-1β和TNF-α表达水平升高(P1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 供试细胞株 PC12细胞由遵义医学院珠海校区生物医药(学)研发中心中药基础及应用研究重点实验室提供。
1.1.2 药品与主要试剂 绿原酸购自成都曼思特生物科技公司(含量≥98%,批号:MUST-16031610);Aβ25-35和二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide,DMSO)购自Sigma公司;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)试剂盒购自碧云天生物技术研究所;细胞凋亡检测试剂盒购自南京凯基生物;丙二醛(malondialdehyde,MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)试剂盒购自南京建成生物工程研究所;肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒和β-actin抗体购自武汉博士德生物工程有限公司;核转录因子κB(nuclear factor kappa β,NF-κB)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)抗体购自Cell Signaling Technology公司;其它试剂均为分析纯 ......
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