潘 登，颜晓勇

    (1.中山大学附属东华医院 风湿免疫科，广东 东莞 523000；2.遵义医学院附属医院 肾病风湿科，贵州 遵义 563099)

    糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy，DN)是糖尿病的主要并发症及死亡原因之一。最近研究证明，炎性反应在DN的发病机制中起关键作用[1-2]。CD26是一种分布于内皮细胞、肾小管上皮细胞及T细胞等多种细胞的跨膜糖蛋白[3]，其可与甘露糖结合凝集素(Mannan binding lectin，MBL)相结合[4-5]，与DN的发生发展密切相关[6]。本实验通过检测高糖刺激下体外培养的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells，HUVEC)的CD26、MBL、C3、MAC及IL-6和NF-kB的表达，探讨CD26对人脐静脉内皮细胞MBL补体途径及微炎症状态的影响及其作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料与试剂 人脐静脉内皮细胞(ATCC，美国)，低糖DMEM培养基(Gibco，美国)，兔抗人CD26多克隆抗体(ab28340)，兔抗人MBL单克隆抗体(ab133629)，兔抗人C5b-9多克隆抗体(ab55811)，兔抗人C3多克隆抗体(ab97462)(Abcam公司，美国)，人CD26引物，人IL-6引物，人NF-kB引物(四川生工科技有限公司)，RNA逆转录试剂盒(TAKARA公司，大连)等。

    1.2 主要仪器 超净工作台(苏州净化有限公司)，二氧化碳培养箱(Thermo，美国)，离心机(Eppendorf，德国)，高压蒸汽灭菌器(SANYO，日本)，pH滴定仪(Jenway，美国)，酶标仪(LISTEO，美国)，Realtime PCR扩增仪(Biorad，美国)等。

    1.3 实验方法

    1.3.1 实验分组 对照组(加入葡萄糖5.5 mmol/L)；高渗组(加入葡萄糖5.5 mmol/L和甘露醇24.5 mmol/L)；高糖组(加入葡萄糖30 mmol/L) ......