剪切应力对晚期内皮祖细胞细胞骨架蛋白表达及分布的影响
信号转导,1材料与方法,2结果,3讨论
张 怡,王 信,成 敏,黄厚今(1.遵义医学院 公共卫生学院卫生毒理学教研室,贵州 遵义 563099;2.遵义医学院附属医院 骨科,贵州 遵义 563099;3.潍坊医学院 医学研究实验中心,山东 潍坊 261053)
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS) 等心脑血管疾病的发生往往是由于血管内皮损伤和修复失衡引起的[1]。而内皮祖细胞(EPCs) 在某些药物刺激、血管损伤以及缺血的情况下,能从骨髓动员至外周血,分化为成熟的内皮细胞,从而参与到血管内皮损伤的修复[2-3]。因此促进EPCs向内皮细胞分化,加速对受损血管内皮的修复是一种新的有效防治AS的重要策略。
本课题组前期研究表明,剪切应力(12 dyne/cm2)可有效促进EPCs分化,特别是作用3 h时,能显著上调内皮分化标志分子CD31、vWF mRNA的表达,加速颈动脉损伤模型大鼠受损内皮的修复[4]。并且在这一过程中细胞骨架蛋白起到了重要的信号转导作用,然而剪切应力是否直接调控EPCs细胞骨架蛋白的表达及分布,迄今未见报道。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)(Invitrogen);梯度离心液(Histopaque?-1083,Sigma);纤维粘连蛋白(fibronectin,Fn,Roche);M199(Gibco);胎牛血清(杭州四季青);Dil-ac-LDL(Molecular Probe);FITC-UEA-1 (Sigma);FAK的兔抗大鼠一抗(Abcam);talin及paxillin的小鼠抗大鼠一抗、HRP标记的羊抗兔IgG、β-action的兔抗大鼠单抗IgG和HRP标记的羊抗小鼠IgG (Santa cruz);多聚甲醛(天津科密欧);150~175 g雄性SD大鼠购自解放军第八十九医院实验动物中心 ......
您现在查看是摘要页,全文长 6202 字符。