林冬融，揭育东，韩江全

    (1.遵义医学院第五附属(珠海)医院 神经内科，广东 珠海 519100；2.遵义医学院第五附属(珠海)医院 急诊科，广东 珠海 519100)

    脑梗死是中老年人的常见病及多发病，其致残率高，严重影响患者的生活质量。细胞凋亡已被公认是脑梗死众多发病机制中的重要一环，以凋亡为主要病理变化的脑缺血半暗带面积大小决定着患者预后。而近年来众多报道均表明，细胞凋亡亦是糖尿病加重脑缺血再灌注损伤的重要机制之一[1-2]。尤瑞克林是我国科研工作者研发的一种治疗急性缺血性脑血管病药物，它可以选择性扩张缺血区脑血管、减轻神经细胞损伤、抑制神经细胞凋亡、促进内源性神经再生[3]。本实验通过模拟糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤的病理生理过程，探讨尤瑞克林对糖尿病合并急性脑缺血再灌注损伤神经细胞的保护机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组 健康雄性SD大鼠82只，8周龄，体重250～300 g，广东省医学实验动物中心提供。所有大鼠随机分为3大组：(1)尤瑞克林治疗组(简称尤瑞克林组)：36只；(2)缺血组：36只；(3)假手术组：10只。前两组再随机分为脑缺血2 h再灌注12 h、24 h、48 h三个亚组，每个亚组12只动物。

    1.2 药物与试剂 链脲佐菌素(Sigma公司)、Cyt-C Rabbit mAb及caspase-3 Rabbit mAb(武汉博士德生物工程有限公司)、S-P超敏试剂盒(福州迈新生物技术开发有限公司)、DAB显色试剂盒(福州迈新生物技术开发有限公司)、TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)、注射用尤瑞克林(广东天普生化医药股份有限公司)。

    1.3 实验仪器 微机血糖仪(美国雅培公司)、MiVnT 显微生物图像分析系统(广东珠海微宇公司)、XMTB数显温控仪(浙制02810215)、培养/干燥箱PH030A(上海一恒科技有限公司)、Leica DM LB2光学显微镜(德国)。

    1.4 方法

    1.4.1 糖尿病模型制作 所有SD大鼠均在实验前8 h禁食，6 h禁水。在术前30 min新鲜配制浓度为5 mg/mL的无菌链脲佐菌素(STZ)。常规消毒后，以2 mg/100 g在大鼠左下腹腔注射STZ ......