何首乌对衰老小鼠脑组织凋亡相关基因表达的影响
差异基因,提取液,1材料与方法,2结果,3讨论
杨江权,邹佳益,徐 林,李文谦,范 芳,何芋岐,葛正龙(1.遵义医科大学 基础医学院生物化学与分子生物学教研室,贵州 遵义 563099;2.遵义医科大学 药学院药学实验室,贵州 遵义 563099)
衰老常表现为机体多组织器官退化,功能异常等变化,并且与认知功能、氧化应激、自由基、炎症等息息相关[1-3]。研究表明,增龄会导致机体组织细胞过量凋亡,加速机体衰老;但抑制细胞凋亡能够明显延缓衰老的发生[4]。因此,研究衰老中相关的凋亡基因能够帮助人们深入的了解衰老以及为延缓衰老提供新的策略和思路。
何首乌(PolygonumMultiflorumThunb,PMT)为蓼科植物,主要用于抗衰老及神经保护、降血脂和抗动脉粥样硬化等[5-6]。在相关的研究中指出,何首乌可以通过清除机体自由基和抗氧化作用来延缓衰老相关性疾病的发生[7-8]。近年来,一些研究也表明何首乌能调控某些凋亡基因的表达,如上调抑制凋亡基因Bcl2的表达,下调促凋亡基因Bax的表达,进而免于细胞凋亡的发生等[9],但何首乌对衰老小鼠凋亡基因组表达的影响尚未见报道。因此本研究将通过转录组测序技术探讨何首乌在衰老过程中对凋亡基因组表达的影响,进一步了解何首乌延缓衰老的机制。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 主要试剂与仪器 何首乌(遵义医科大学附属医院中药房,经遵义医科大学匡菊香副教授鉴定为蓼科植物何首乌的块根),丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)测试盒(南京建成生物工程研究所),D-半乳糖(Sigma,美国),冷冻离心机(MICRO173,美国),RNAiso Plus(Takara,日本),微量核酸蛋白分析仪(Eppendorf,德国),梯度PCR仪(Flex cycler,美国),实时荧光定量PCR仪(EFX96,美国),PrimeScriptTMRT试剂盒(Takara,日本),TB GreenTMPremix Ex TaqTMⅡ试剂盒(Takara,日本)。
1.1.2 实验动物及分组 60只C57BL/6雄性小鼠,20±2 g,购自辽宁长生生物技术公司[生产许可证号:SCXK-(辽)2015-0001] ......
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