郑 洁，庹 利,2，李 伟，保玉心，2

    (1.遵义医科大学 研究生院，贵州 遵义 563099;2.遵义医科大学 医学与生物学研究中心 遵义市理化分析测试工程研究中心，贵州 遵义 563099)

    放线菌因其次级代谢产物结构的复杂性和多样性而具有抗感染、抗肿瘤等生物活性[1]。目前在临床上应用的抗生素有3/4是由放线菌生产的[2]。如临床广泛应用的链霉素、阿奇霉素等[3]。随着抗生素的广泛使用，病原菌的耐药性急剧增强，使得现有抗生素越来越不足以应对这种局面，因此迫切需要新型抗生素，以适应病原菌对抗生素敏感性改变的速度[4-6]。放线菌在自然界中分布广泛，近年来，为了获取新的放线菌资源，人们逐渐将目光投向一些特殊环境[7]。沿海滩涂是介于陆地与海洋的生态系统交错区，受到海洋和陆地环境的双重影响，因此滩涂土壤中可能拥有独特的、既不同于陆地也不同于海洋环境的微生物资源[8-9]。有研究表明，滩涂沉积物中培养分离得到的细菌中有20%～30%属于新菌种[10]。在同属黄海区域的朝鲜半岛潮间带沉积物中，Lin等[11]分离到好氧菌株Marinimicrobiumkoreense和Marinimicrobiumagarilyticum；Bruns等[12]在德国北海潮间带沉积物中分离到厌氧菌株Muricaudaruestringensis；Choi等[13]分离到从属于Flavobacteriaceae的菌株Lutibacterlitoralis，这些结果表明滩涂土壤中可能具有独特的微生物资源。江苏盐城沿海滩涂湿地位于我国沿海地区中东部，属于从北亚热带向南暖温带过渡地带，是太平洋西海岸亚洲大陆边缘面积最大、原始生态保持最完好的海岸型天然湿地。目前，关于江苏盐城沿海湿地微生物特别是放线菌研究报道较少，纪元、张小蒙等只对江苏盐城沿海滩涂进行了简单的放线菌菌落计数[14-15]。对该地区放线菌的多样性及抗生素生物合成基因未见报道。本研究从江苏盐城沿海采集滩涂土壤样品，通过纯培养的方法对该地区的放线菌进行分离鉴定、多样性分析及抗生素生物合成基因筛选，以了解该地区放线菌分布特点，同时期待发现放线菌新物种或稀有放线菌，为新抗生素发现提供菌种储备，为进一步开发利用滩涂湿地放线菌资源开发和利用提供科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 土壤样品 2018年2月，围绕盐城市射阳县黄海海域每隔10～20 m设置采样点一个(样品采集地点见表1)。去除土壤表面覆盖的泥沙后，用无菌铲铲取20 cm深度土样后立即放入无菌封口袋中 ......