薛建昌，梁冰锋，吴海峰，郑 浩，孙志平，任 哲

    (1.河北省胸科医院 检验科，河北 石家庄 050041；2.河北女子职业技术学院 护理系，河北 石家庄 050091；3.河北省胸科医院 超声室，河北 石家庄 050041)

    在世界范围内，结核病是导致死亡的十大原因之一，且随着耐药结核病的日益增多，我国乃至全球结核病的疫情防控工作面临着巨大的挑战[1]。根据世界卫生组织(World health organization，WHO)估计，2017年全球范围内约55.8万结核病患者发展为对利福平有抵抗力，其中约82%为多重耐药结核病，而且有三个国家几乎占全球耐多药和利福平耐药结核病的一半，分别为：印度(24%)，中国(13%)和俄罗斯联邦(10%)[2]。抗结核药物的敏感性试验(药敏试验)仍是目前诊断耐药结核的“金标准”，但确诊周期较长，严重阻碍着耐药结核病的防控工作。故需要更加准确、快速对结核分枝杆菌及其耐药情况进行检测的方法或技术的推广。

    近年来，随着分子生物学技术的快速发展，对利福平等抗结核药物基因突变进行快速检测逐渐被广泛接受。荧光定量PCR探针熔解曲线法，因检测RR-TB耗时较短、特异度强、灵敏度高和快速易操作等优点，逐渐在临床检测中得以应用[3-5]。WHO所推荐的新型的分子检测方法——Gene Xpert MTB/RIF技术采用实时荧光定量核酸扩增技术，操作过程简单，提取及扩增全程闭管操作，全自动运行与检测，受到国内外学者的普遍关注[6-8]。本文首次对2种结核分枝杆菌耐药基因突变检测方法诊断肺结核患者涂阳标本进行对比评价，评估其诊断耐利福平结核病的效能，进一步研究在耐药结核病控制中的应用价值。

    1 材料与方法

    1.1 样本来源 收集2016年2月至2018年6月在河北省胸科医院就诊肺结核患者临床标本278例，其中包含痰标本138例，支气管肺泡灌洗液140例，痰涂片鉴定均为结核分枝杆菌阳性。样本来院患者年龄由12岁至66岁，平均年龄为35.70岁；男性患者178例，女性患者100例。

    1.2 试剂和材料 Gene Xpert MTB/RIF检测试剂盒(Cepheid产品，美国)，结核分枝杆菌耐药突变检测试剂盒(荧光PCR熔解曲线法)购自厦门致善生物科技有限公司。

    1.3 检测方法

    1.3.1 比例法药敏试验 将待测结核菌制备成1 mg/mL的菌悬液，再稀释成10-2mg/mL，取一接种环(即0.01 mL)，用划线法均匀接种到对照及含0.2 ug/mL RIF的罗氏培养基表面 ......