李 林，左青青，谢 欣，刘朝波，陈 立，张 俊，钱 刚

    (1.遵义医科大学 基础医学院细胞生物学教研室，贵州 遵义 563099；2.遵义医科大学 第一临床学院，贵州 遵义 563099)

    千里光(SenecioscandensBuch.-Ham.Ex D.)，为菊科(Composite)千里光属多年生草本植物，其性寒、味苦，具有清热解毒、明目、止痒等功效，多用于风热感冒、目赤肿痛、泄泻痢疾、皮肤湿疹疮疖[1-2]等治疗，是我国应用历史悠久的传统中药。现代药理学研究表明，千里光中主要含有生物碱类、酚酸类、黄酮类、萜类等多种成分，具有抗菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化及清除自由基和毒理等作用[3]，也是千里光抗菌作用的有效成分[4]。而从代谢合成上看，植物酚酸类、黄酮类化合物的苯丙基骨架主要通过苯丙烷代谢途径合成[5]，结构上看生物碱类、菲类、联菲类等化合物均是具有苯环结构的化合物，其对应苯丙基单元主要由苯丙烷代谢通路提供。因此，作为苯丙烷途径的限速酶的苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)，也被认为是上述化合物合成途径中的重要酶，是药用植物化学成分合成以及调控研究中的重要内容。此外，PAL也参与植物的生长发育等生物学过程，对抵御病虫害、防紫外线及构成植物支撑系统等具有重要作用[6]。目前国内外对PAL的研究报道较多，但主要集中在它的提取纯化、抗逆境、生理作用等方面[7]，关于千里光苯丙氨酸解氨酶的研究还未见报道。

    本研究中对具有良好抗菌性的千里光材料中的苯丙氨酸解氨酶基因进行克隆，对其编码蛋白进行分子特征及系统生物学进化分析，为分析高等植物PAL的基因结构研究提供基础资料，对揭示千里光药用成分合成乃至抗菌性状机制具有重要意义。

    1 材料与方法

    1.1 材料、仪器和试剂 试验材料：本课题组采自贵州省遵义地区的野生千里光，并经抗菌性实验(MIC，最低抑菌浓度)证实具有良好抗菌性 ......