黄芪多糖通过miR-193a-3p/STMN1轴对溃疡性结肠炎大鼠结肠细胞凋亡和氧化应激的影响
1材料与方法,2结果,3讨论
向 莉,刘 飞,陈 秋,丁祥武,颜悦蓉(1.恩施州利川市民族中医院 药剂科,湖北 利川 445400;2.湖北文理学院附属医院,襄阳市中心医院 消化内科,湖北 襄阳 441021)
溃疡性结肠炎是炎症性肠病的主要形式,其特征为肠粘膜具有慢性炎症和溃疡性病变[1]。溃疡性结肠炎的临床表现主要包括持续性或反复性腹泻,带粘液,血液和脓液的粪便,腹痛和各种全身症状[2]。该病的发生严重影响患者的正常生活、工作和心理健康[3]。并且,溃疡性结肠炎的病程漫长并且难以治愈,患者罹患癌症的风险更高[4]。因此,给予溃疡性结肠炎有效的治疗非常重要。黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)是从黄芪中提取的主要生物活性成分之一,在氧化应激,免疫性疾病和癌症的治疗中起着重要作用[5]。研究表明,黄芪多糖联合苦参碱对大鼠溃疡性结肠炎及相关肺损伤具有协同保护作用[5]。但是,黄芪多糖对溃疡性结肠炎的影响及潜在机理尚未完全阐明。研究发现,微小RNA(MicroRNA,miRNA)在溃疡性结肠炎进展中发挥重要作用。miR-193a-3p在溃疡性结肠炎组织中表达下调,是溃疡性结肠炎相关结肠癌的关键肿瘤抑制基因[6]。本研究生物信息学预测显示,STMN1 3’UTR序列中含有与miR-193a-3p的核苷酸序列。基因表达部分受miRNA的调控,miRNA通过与信使RNA(mRNA)的3’非翻译区(UTR)结合来调节基因表达,并抑制蛋白质翻译或破坏目标mRNA的稳定性。研究报道,Stathmin 1(STMN1)在溃疡性结肠炎组织中表达上调,溃疡性结肠炎患者STMN1积累与增生和赘生性病变相关[7]。基于上述研究结果,本研究猜想黄芪多糖通过miR-193a-3p/STMN1轴影响溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞的凋亡,利用三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzen esulfonic acid,TNBS)/乙醇复合法构建大鼠溃疡型结肠炎模型[8],分离培养溃疡性结肠炎大鼠结肠上皮细胞,并针对此进行验证。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 (无特定病原体)60只雄性SD大鼠(6周龄;体重300±20 g),购自上海斯莱克实验动物有限公司,许可证号SCXK(沪)2017-0005。动物饲养在温度(23±2)℃和湿度(55±5)%恒定的条件下,人工照明(12 h的光/暗周期),自由进食和饮水。适应性饲养7 d后进行大鼠溃疡性结肠炎模型诱导。
1.1.2 药品 黄芪多糖 (纯度≥90.0% ......
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