吴 丹,冯 靖,车宇娥,张晓风,刘雨梦,刘嘉鹏,王 谦,李姝玉

    (北京中医药大学 中医学院病理学教研室,北京 100029)

    据2019年的统计,在全世界范围内20～79岁的成年人群中,糖尿病(diabetes mellitus,DM)的发病人数高达4.63亿[1]。值得注意的是,DM最常见的微血管并发症之一是糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD),DKD同样也是糖尿病患者出现残疾和死亡的一个主要原因[2-3]。基底膜厚度增加,肾小球出现硬化,肾小球系膜区增宽,足细胞减少及足突融合消失等均为DKD的肾脏病理变化;DKD患者的临床症状可表现为肾功能不全以及白蛋白尿增加[4-5]。DKD早期足细胞结构和功能的损伤,是引起患者蛋白尿及肾功能不全的病理结构基础[6]。中医治疗糖尿病肾病的研究较多且疗效显著[7-9]。

    肾气丸来源于医圣张仲景的名方,其处方共由八位药组成,包括山药、干地黄、泽泻、山茱萸、牡丹皮、茯苓、炮附子及桂枝,各味药在临床中被广泛应用于治疗DKD,疗效显著[10]。然而,其治疗DKD的作用机制尚不清楚。本课题组以往的研究中已发现,肾气丸能够缓解2型糖尿病小鼠肾组织结构及功能损伤,本实验以Zucker糖尿病肥胖(zucker diabetes fatty,ZDF)大鼠作为DKD模型,在药效学及病理学评价基础上,观察肾气丸对肾功能、肾脏组织结构及足细胞损伤的影响,为中医经典方剂在糖尿病与DKD 的应用上提供更加丰富的现代解读。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 实验动物为SPF级雄性ZDF(fa/+)和ZDF(fa/fa)大鼠。ZDF(fa/fa)大鼠是研究2型糖尿病的动物模型,由Zucker大鼠近交繁殖得到,为瘦素受体基因(Fa基因)突变产生的隐性基因,经特殊饲料诱导后,可自发出现肥胖、胰岛素抵抗、高血脂等代谢异常综合征。ZDF(fa/+)是与ZDF(fa/fa)基因同源性的大鼠,可正常表达瘦素受体,调节摄食和机体能量平衡,无代谢紊乱症状,常用作ZDF(fa/fa)大鼠的对照组模型动物。选取14只12周龄ZDF(fa/+)大鼠作为对照组,体重350 g左右。选取40只12周龄ZDF(fa/fa)大鼠(已喂养5C08优质啮齿类饲料诱导4周,建立2型糖尿病模型)作为模型组及肾气丸组,体重400 g左右,测定血糖,并且选取随机血糖 ≥ 16.7 mmol/L的大鼠为模型成功大鼠;按随机数字表法随机分为模型组及肾气丸组,每组20只;3组大鼠12周龄不取材,测定血糖,16及20周龄取材;12、16、20周龄对照组大鼠各7只,12、16、20周龄模型组大鼠各10只,12、16、20周龄肾气丸组大鼠各10只 ......