田志成，曹紫萱，李 娟，王 菲，刘可欣，，徐 蕾，李海涛，罗 鹏，罗 层，蒋晓帆 (空军军医大学：西京医院神经外科，基础医学院神经生物学教研室，基础医学院学员六大队，陕西 西安 700；陕西中医药大学，陕西 咸阳 706；空军军医大学基础医学院学员四大队，陕西 西安 700)

    慢性痛被定义为与实际或潜在组织损伤相关的或类似的不愉快的感觉和情绪体验，是当今世界最普遍的健康问题之一，给人类社会带来了巨大的经济负担[1-2]。据统计，慢性痛的患病率在11%～40%之间[1]。慢性痛损害了患者的身心健康，降低了患者的生活质量[3]。长期的慢性痛会引起患者产生负性情绪，比如焦虑和抑郁。大脑前额叶皮质(prefrontal cortex，PFC)是自上而下调节感觉输入的重要中心[4]，参与处理疼痛信号及相关负性情绪，在周围神经损伤引起慢性疼痛的啮齿动物中，内侧前额叶皮质(medial PFC，mPFC)前额叶区域的第5层锥体神经元活性降低[5]，激活锥体神经元既可以缓解伤害性痛觉[6-7]，又可以减少疼痛伴发的抑郁样行为[8]和焦虑样行为[9]。因此，mPFC是治疗慢性痛伴发负性情绪的重要脑区之一。

    N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptors，NMDARs)是一种离子型谷氨酸受体，在中枢神经系统生理和疾病过程中发挥着重要的作用[10]。NMDARs是由不同亚基构成的四聚体，其中NR1亚基是NMDARs执行功能所必需的亚单位[11-12]。有研究表明，NMDARs参与脊髓伤害感受器的痛觉传递与致敏[13-14]，神经病理性疼痛小鼠模型的脊髓背角中NR1的表达增加[15]。此外，NMDARs的磷酸化对其功能影响甚大。例如，NMDARs的NR1亚基的膜运输和激活在阿片类药物引起的痛敏中起着关键作用[16]，而NMDARs的NR1亚基的运输取决于其磷酸化[17]。因此，探究慢性痛伴发负性情绪时NR1在mPFC脑区的表达及磷酸化修饰改变是有必要的。

    因此，本研究采用经典的选择性坐骨神经损伤(spared nerve injury，SNI)模型，使用痛行为检测、动物行为学、Western blotting以及免疫荧光染色的方法，揭示在慢性痛伴发负性情绪的条件下，mPFC脑区中NR1的表达及磷酸化修饰的变化。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 C57BL/6雄性小鼠(6～8周龄)，体质量(23±3)g，由空军军医大学实验动物中心提供 ......