急性缺氧致小鼠脑血管平滑肌功能改变的转录组学分析
低气压,脑损伤,1材料与方法,2方法,2结果,1模拟高原环境导致小鼠脑血管收缩功能改变,2小鼠原代CVSMCs鉴定,3基因表达差异分析,4DEGs的GO富集分析,5DEGs的KEGG通路分析,6利用qRT-PC
常 玮,李亚娟,臧克海,李少华,刘美杰,刘峰舟,4,薛军辉,4(空军军医大学:1航空航天医学系航空航天临床医学中心,2航空航天医学系航空航天生理学教研室,3航空航天医学系飞行人员疗养与康复教研室,4西京医院空勤科,陕西 西安 710032)
随着经济的发展,我国每年出于生活、援建以及执行军事任务等目的进入高原的人员超过3 000万[1]。急进高原(海拔超过1 000 m)并进行相关作业对于长期生活在平原地区的人员来说是一项巨大挑战[2]。因为发病机制尚不明确,所以不同程度的低气压缺氧脑损伤在急进高原人群中的发生率很高且尚无很好的防治措施。目前已有研究证实血管屏障破坏以及脑血流增加所引起的血管源性水肿是低气压缺氧脑损伤发生发展的主要原因[3]。脑血管平滑肌作为脑血管壁的重要组成部分,在维持大脑血管的正常功能中发挥着至关重要的作用[4]。然而,在急性低气压缺氧环境下,脑血管平滑肌细胞(cerebrovascular smooth muscle cells,CVSMCs)会发生怎样的功能改变进而影响低气压缺氧脑损伤的发生发展还有待进一步研究。本研究观察了低气压缺氧条件下的脑损伤以及脑血管平滑肌功能结构的变化,并对小鼠脑血管平滑肌原代细胞进行转录组学分析,为阐明低气压缺氧脑损伤的发生机制提供了新的思路,对于寻找有效的防治策略、降低低气压缺氧脑损伤的发生率具有一定的意义。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 本实验采用6周龄左右雄性C57BL/6J小鼠,体质量18~22 g,由空军军医大学实验动物中心提供。领取小鼠后,将动物饲养温度控制在20~25 ℃,实验室明暗交替时间为12 h∶12 h,自由进食与饮水。所有动物实验均经空军军医大学实验动物福利与伦理委员会批准[许可证号:SCXK(军)2017-0021]。小鼠适应性喂养1周后,将其中20只小鼠随机分为平原组(Sham组)以及高原组(HA组),每组10只。另取20只C57BL/6J小鼠进行原代细胞的分离培养。
1.1.2 主要试剂 Ham’s F-12培养基(#31765035,GbicoTM,美国),胎牛血清(#10099-141,GbicoTM,美国),α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)抗体(YT5797,Immunoway,美国),通用型抗体稀释液(WB500D,新赛美,中国),杜氏磷酸盐缓冲液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline ......
您现在查看是摘要页,全文长 14547 字符。