纤维连接蛋白(FN)基因多态性及蛋白表达与草酸钙肾结石相关性研究(2)
FN基因型检测:1、FN基因rs35343655位点的引物序列为上游5'-TACACTTACAGGATAGAAACACAGA-3';下 游 5'- CTCGGGATGATGGCGGAT-3'。FN基因rs10202709位点的引物序列为上游5'-TATGGCCTTTTCCTAAGAGCCTGA-3';下游5'- GGGCAAACCTCAAAGTTCGGA-3',由上海生工生物公司合成。2、DNA提取:采集外周静脉血4ml,采用睿玻生物生产的基因组提取试剂盒提取。3、PCR扩增目的基因片段:FN基因rs35343655位点的多态性反应体系总体积20ml,PCR扩增条件为:94°C预变性2min,98°C变性30s,55°C退火30s,68°C延伸30s,40个循环;68°C再延伸5min。4、测序:PCR产物经10g/L 琼脂糖凝胶电泳鉴定,用ABI 3730 XL测序仪测序分析。?1.3 统计学方法
应用SPSS 17.0 软件进行统计分析 ......
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