循环肿瘤细胞在肝细胞癌中的研究应用(2)
多种方式相结合的CTC富集方法为处理CTC检测中成本高、耗时久的弊端,微流控芯片技术作为新型检测系统应运而生。微流控芯片技术把免疫亲和性和细胞大小相结合,设计出一种可以高效分离循环肿瘤细胞的微结构单元装置,分离效率可超过90%[7],由于微流控芯片技术富集CTC的特异性以及敏感性都较高,从而受到学者的广泛关注[8]。在微流控芯片的表面布满了可以包被特异性抗体的位点,在操作人员的精准控制下,外周血液细胞在流过芯片时,微流控芯片上的抗体便会特异性识别,并和循环肿瘤细胞表面的抗原相结合[9]。和以往常规的富集方法比较,微流控芯片具有易脱洗、回收率高、细胞破坏少且分离速度快的特点[10],并为之后 CTC 的培养与分析提供了机会,在临床应用中有着广阔的应用前景和巨大的潜力。2.2 鉴定
免疫荧光标记技术是在循环肿瘤细胞鉴定技术里最为常用的一种手段,荧光标记法主要基于细胞的抗原-抗体反应来识别CTCs与非CTCs细胞。所以,适合的荧光抗体或者抗体组合是鉴定技术的关键。CellSearch 系统便是使用免疫荧光标记法对循环肿瘤细胞进行鉴定,在这个系统里,通过应用一种核内染色剂( DAPI) 来进行免疫组化的染色,其原理是将携带EpCAM抗体的磁珠耦合,并定义为CK8、CK18、CK19阳性,CD45阴性的有核细胞。但有研究发现,CTCs 在脱离原肿瘤组织进入外周血液向其余组织转移的过程中,细胞会发生EMT (上皮-间质的转化) 。但是与其余大部分类型的上皮性肿瘤不同,几乎所有的肝癌细胞都不能正常表达EpCAM,这从很大程度上限制了基于 EpCAM各项检测技术在临床上的应用 ......
您现在查看是摘要页,全文长 6299 字符。