常莎莎, 李可欣, 罗 月, 李文攀, 陈大为

    (沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 110016)

    层层组装法制备仿生exosomes的研究

    常莎莎, 李可欣, 罗 月, 李文攀, 陈大为*

    (沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 110016)

    目的优化包载异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白(BSA-FITC)仿生exosomes 的处方工艺及制备。方法采用BSA-FITC作为模型蛋白，以包封率为考察指标，借助三因素三水平星点设计-效应面法对外层DOPE与内层PC质量比、组装温度、外层DOPE与DC-Chol质量比进行优化，筛选最佳处方，确定层层组装法制备对蛋白质多肽类药物具有较高包封率的仿生exosomes，并对其制剂学性质进行考察。结果优化处方为：外层DOPE与内层PC质量比为2.20∶1，内外层混合后旋转蒸发温度为58 ℃，外层DOPE与DC-Chol质量比为4.28∶1，所制得仿生exosomes的平均粒径(62.7±6.33) nm，多分散系数(P.I.)为0.286，包封率为(91.02±0.17)%。结论星点设计-效应面法所建立的模型预测性良好，成功实现了对仿生exosomes的处方优化，层层组装法成功制备了对蛋白质多肽类药物具有较高包封率且粒径较小的仿生exosomes。

    药剂学；仿生exosomes；层层组装法；异硫氰酸荧光素-牛血清白蛋白；星点设计

    Exosomes起源于内吞体系统，并被排出细胞外，是一类直径为40～100 nm的由脂质双层膜包裹的球体结构[1-2]，含有许多与来源细胞功能相关的蛋白质或肽类[3]。由于其结构与脂质体类似，提示可以用药剂学的理论和手段人工组建具有exosomes结构性及功能性的纳米仿生exosomes作为细胞间传递信息的新型载体[4]。

    蛋白质多肽类药物因其具有良好的水溶性，通常采用逆向蒸发法制备，但在完成有机溶剂蒸发的过程中，容易造成药物的泄露，使包封率降低。本实验中，作者借助层层组装的理念，选择异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白(BSA-FITC)为模型蛋白，采用层层组装法制备纳米仿生exosomes，通过灵敏度较高的荧光检测法测定包封率，并依靠三因素三水平的星点设计获得了最优处方，这为仿生exosomes的体外构建奠定了基础。

    1 仪器与材料

    SHZ-D循环水式真空泵、DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器(巩义市英峪华仪器厂)，旋转蒸发仪( 上海亚荣生化仪器厂) ，JY92-2D超声波细胞粉碎机( 宁波新芝科器研究所) ......