ＳＤ大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立(2)
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GroupnGenderImmunogenDosageTimes of Injection*A(PBS)10♂PBS0 1ml/100g1B(1BSCH, ♂)20♂BSCH0 1ml/100g1C(2BSCH, ♂)20♂BSCH0 06ml/100g2D(1SD-SCH, ♂)20♂SD-SCH0 1ml/100g1E (2SD-SCH, ♂)20♂SD-SCH0 06ml/100g2F (2SD-SCH, ♀)20♀SD-SCH0 06ml/100g2*The second injection was the seventh day after the first one
1 3 临床评分[1] 大鼠被致敏后，每日采用盲法由两名观察者按EAE症状评分标准对大鼠进行功能评分：0分：无任何临床症状；1分：尾部张力消失，可见轻度步态笨拙；2分：双后肢无力，被动翻身后可以恢复；3分：双后肢瘫痪，被动翻身后不能恢复，但给予刺激后可以挪动；4分：双后肢瘫痪，前肢瘫痪或肌力减弱伴尿便失禁；5分：濒死状态或死亡。症状介于两者标准之间者以±0 5计。另外，“平均最高临床分值”由在发病期间，组内动物最高分值的总和除以动物数目获得，“每日临床积分均值”由当日该组动物临床积分的总和除以动物数目获得(死亡动物不重复计分)。
1 4 病理取材 各实验组在发病高峰期及恢复期取1只大鼠处死做病理组织学检查。对照组大鼠也分别在相应时间点各取1只做病理学检查。其余动物在实验开始后的第70天处死。
1 4 1 组织病理切片制作 采用10%水合氯醛麻醉动物，先用生理盐水左心室冲洗，再用4%多聚甲醛灌注固定，取脊髓及脑组织固定于多聚甲醛中，脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋切片后，常规HE染色、尼氏染色，髓鞘特殊染色(砂罗铬花青法)，进行光镜检查。
1 4 2 电镜切片制作 麻醉动物，常规生理盐水冲洗后，滴注电镜预固定液(1%戊二醛，4%多聚甲醛，0 1M PBS混合液，PH 7 2～7 4), 取脊髓及脑组织(每块大小约1mmx1mmx1mm)放置于固定液过夜，次日取出，过饿酸，梯度酒精，丙酮，包埋。
1 5 MRI 扫描 将评分为4分的动物麻醉后，使其接受0 5T MRI 扫描，分别获得准T1，T2加权像。
1 6 统计学处理 各组数据用t检验，结果以±s表示，P值
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