浅谈免疫组化工作中的注意事项
免疫组化,是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应的一个实验。以成为病理诊断不可或缺的重要手段,随着试剂盒的不断优化,正确率也在不断提高。但免疫组化实验过程步骤繁多,稍不注意容易影响结果。本人谈谈工作中发现的注意事项。1、切片:3-4微米
免疫组化实验是一个以抗原抗体反应为基础的实验项目。所以抗原的多少直接影响实验的质量。所以石蜡切片的厚度为3~4微米较好,过厚,石蜡切片在修复时容易掉片,过薄,影响目的部位的表达,不利于诊断。
2、载玻片:硅化玻片
石蜡切片贴在载玻片上进行免疫组化染色,由于染色过程操作步骤及洗片次数较多,容易出现脱片现象,所以,用硅化玻片承载蜡片。
3、烤片:温度60℃~65℃、时间2~4小时
为什么要选择60℃~65℃呢?因为病理科常用的石蜡多为硬蜡。其熔点在60℃左右。组织浸蜡时,浸蜡箱中的温度一般设置为65℃左右。
为什么时间是2~4小时呢?其实,切片在60℃~65℃的烤箱内烤2~24小时,对抗原的表达没有影响 ......
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