《中华肾脏病杂志》：miR-129-5p参与腹膜间皮细胞EMT
中南大学湘雅二医院肾内科的一项研究表明，miR-129-5p(microRNA-129-5p)可能参与PD状态下腹膜间皮细胞上皮-间充质转分化(EMT)，并可能通过转录后调控SIP1参与该过程，以miR-129-5p/SIP1为靶点，可望为PD腹膜纤维化防治提供一种新途径。该研究发表在2015年第4期《中华肾脏病杂志》上。
该研究的目的是探讨miR-129-5p对腹膜间皮细胞EMT的调节作用及可能的分子机制。研究通过分离培养新开管腹膜透析(PD)组和PD 6个月以上组两组患者腹透流出液的腹膜间皮细胞，采用Taqman探针实时荧光定量PCR法检测其中miR-129-5p的表达差异。5μg/L TGF-β1刺激腹膜间皮细胞株(HPMCs)0~72h，观察TGF-β1对HPMCs细胞miR-129-5p表达的影响；预转染miR-129-5p前体(pre-miR-129-5p)使HPMCs中miR-129-5p过表达，再给予5μg/L TGF-β1刺激48h，采用实时荧光定量PCR、Western印迹和细胞免疫荧光等方法，观察过表达miR-129-5p对TGF-β1诱导的HPMCs EMT相关蛋白和基因表达的影响。同时，观察5μg/LTGF-β1作用不同时间(0~72h)对HPMCsSmad作用蛋白1(SIP1，miR-129-5p生物预测下游因子)表达的影响以及过表达miR-129-5p对其mRNA和蛋白水平的调节作用。
结果，PD 6个月以上组患者透出液分离培养的腹膜间皮细胞中miR-129-5p的表达显著低于新开管组(P<0.01)；5μg/L外源性TGF-β1刺激，可使HPMCs的miR-129-5p表达明显降低，呈时间依赖性，pre-miR-129-5p预转染可明显恢复TGF-β1诱导的上皮标志物E-cadherin mRNA和蛋白的表达，并抑制TGF-β1引起的间充质标志物Vimentin mRNA和蛋白的高表达(均P<0.01)。另外，TGF-β1可呈时间依赖性增加SIP1的mRNA和蛋白表达(均P<0.01)，而pre-miR-129-5p可明显抑制TGF-β1诱导的SIP1蛋白表达(P<0.01)，对其mRNA表达则无明显影响(P>0.05)。
《医学科学报》 (第23期 第6版 国内期刊), http://www.100md.com
该研究的目的是探讨miR-129-5p对腹膜间皮细胞EMT的调节作用及可能的分子机制。研究通过分离培养新开管腹膜透析(PD)组和PD 6个月以上组两组患者腹透流出液的腹膜间皮细胞，采用Taqman探针实时荧光定量PCR法检测其中miR-129-5p的表达差异。5μg/L TGF-β1刺激腹膜间皮细胞株(HPMCs)0~72h，观察TGF-β1对HPMCs细胞miR-129-5p表达的影响；预转染miR-129-5p前体(pre-miR-129-5p)使HPMCs中miR-129-5p过表达，再给予5μg/L TGF-β1刺激48h，采用实时荧光定量PCR、Western印迹和细胞免疫荧光等方法，观察过表达miR-129-5p对TGF-β1诱导的HPMCs EMT相关蛋白和基因表达的影响。同时，观察5μg/LTGF-β1作用不同时间(0~72h)对HPMCsSmad作用蛋白1(SIP1，miR-129-5p生物预测下游因子)表达的影响以及过表达miR-129-5p对其mRNA和蛋白水平的调节作用。
结果，PD 6个月以上组患者透出液分离培养的腹膜间皮细胞中miR-129-5p的表达显著低于新开管组(P<0.01)；5μg/L外源性TGF-β1刺激，可使HPMCs的miR-129-5p表达明显降低，呈时间依赖性，pre-miR-129-5p预转染可明显恢复TGF-β1诱导的上皮标志物E-cadherin mRNA和蛋白的表达，并抑制TGF-β1引起的间充质标志物Vimentin mRNA和蛋白的高表达(均P<0.01)。另外，TGF-β1可呈时间依赖性增加SIP1的mRNA和蛋白表达(均P<0.01)，而pre-miR-129-5p可明显抑制TGF-β1诱导的SIP1蛋白表达(P<0.01)，对其mRNA表达则无明显影响(P>0.05)。
《医学科学报》 (第23期 第6版 国内期刊), http://www.100md.com