《中华眼科杂志》:红景天苷对HLEC有保护作用
郑州大学第一附属医院眼科一项研究表明,红景天苷对发生氧化损伤的人晶状体上皮细胞(HLEC)具有保护作用,能够抑制HLEC凋亡。该研究发表在2015年第52期《中华眼科杂志》上。
研究目的是探讨红景天苷对体外培养的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤的影响。实验研究应用H2O2诱导HLEC建立氧化损伤模型,观察红景天苷对其产生的作用。对数生长期的HLEC分别加入不同浓度(0、10、30、50、100、200 μmol/L)的红景天苷干预24 h后,运用细胞计数试剂盒法检测各组HLEC增殖活力。实验分为5组:空白对照组、H2O2损伤组、红景天苷低剂量组(30 μmol/L红景天苷+H2O2组)、红景天苷中剂量组(50 μmol/L红景大苷+H2O2组)、红景天苷高剂量组(100 μmol/L红景天苷+H2O2组)。采用Hoechst33258染色和流式细胞仪检测细胞凋亡:RT-PCR法检测细胞内B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)及半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)基因的表达。单因素方差分析用于组间均数的多重比较,进一步组间两两比较采用LSD-t检验。
结果,细胞计数试剂盒法结果显示,当H2O2的浓度为200 μmol/L时,HLEC的生存抑制率为49.56%±7.07%,接近于细胞生存的半数抑制率(IC50)。因此,选择200 μmol/L作为H2O2后续实验浓度。不同浓度红景天甘对细胞活性均无抑制作用,红景天苷(10μmol/L、30 μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200 μmol/L)干预细胞24 h后,细胞存活率分别为100.24%±2.07%、101.18%±2.14%、101.32%±2.48%、101.76%±1.93%、99.28%±1.74%,与空白对照组99.84%±2.21%相比,差异均无统计学意义(组间比较F=1.044,P=0.415:两两比较P>0.05)。Hoechst 33258染色可见H2O2损伤组有较多HLEC胞核呈致密浓染(凋亡小体),红景天苷干预组HLEC胞核浓染状况明显减轻。流式细胞仪结果显示空白对照组HLEC凋亡率为2.26%±0.29%,H2O2损伤组HLEC凋亡率为44.56%±4.28%,经30、50、100μmol/L红景天苷处理后,HLEC凋亡率分别降为31.52%±3.05%、24.06%±4.25%和17.16%±2.75%,5个组间细胞凋亡率的差异具有统计学意义,且红景天苷浓度越高,HLEC凋亡率越低(F=117.082,P<0.01,两两比较P值均<0.01)。与空白对照组相比,H2O2损伤组Bax和Caspase-3的表达明显增高,Bcl-2的表达明显降低,差异有统计学意义(P值均<0.01)。与H2O2损伤组相比,低、中、高剂量红景天苷组Bcl-2基因表达均上调,Bax和Caspase-3基因表达均下调,其中,高剂量组Bcl-2上调及Bax、Caspase-3下调的更为明显。各组之间差异有统计学意义(Bax:F=493.554,P<0.01: Bcl-2:F=827.820,P<0.01:Caspase-3:F =537.237,P<0.01)。
《医学科学报》 (第19期 第6版 国内期刊), http://www.100md.com
研究目的是探讨红景天苷对体外培养的人晶状体上皮细胞(HLEC)氧化损伤的影响。实验研究应用H2O2诱导HLEC建立氧化损伤模型,观察红景天苷对其产生的作用。对数生长期的HLEC分别加入不同浓度(0、10、30、50、100、200 μmol/L)的红景天苷干预24 h后,运用细胞计数试剂盒法检测各组HLEC增殖活力。实验分为5组:空白对照组、H2O2损伤组、红景天苷低剂量组(30 μmol/L红景天苷+H2O2组)、红景天苷中剂量组(50 μmol/L红景大苷+H2O2组)、红景天苷高剂量组(100 μmol/L红景天苷+H2O2组)。采用Hoechst33258染色和流式细胞仪检测细胞凋亡:RT-PCR法检测细胞内B细胞淋巴瘤-2相关x蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)及半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)基因的表达。单因素方差分析用于组间均数的多重比较,进一步组间两两比较采用LSD-t检验。
结果,细胞计数试剂盒法结果显示,当H2O2的浓度为200 μmol/L时,HLEC的生存抑制率为49.56%±7.07%,接近于细胞生存的半数抑制率(IC50)。因此,选择200 μmol/L作为H2O2后续实验浓度。不同浓度红景天甘对细胞活性均无抑制作用,红景天苷(10μmol/L、30 μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200 μmol/L)干预细胞24 h后,细胞存活率分别为100.24%±2.07%、101.18%±2.14%、101.32%±2.48%、101.76%±1.93%、99.28%±1.74%,与空白对照组99.84%±2.21%相比,差异均无统计学意义(组间比较F=1.044,P=0.415:两两比较P>0.05)。Hoechst 33258染色可见H2O2损伤组有较多HLEC胞核呈致密浓染(凋亡小体),红景天苷干预组HLEC胞核浓染状况明显减轻。流式细胞仪结果显示空白对照组HLEC凋亡率为2.26%±0.29%,H2O2损伤组HLEC凋亡率为44.56%±4.28%,经30、50、100μmol/L红景天苷处理后,HLEC凋亡率分别降为31.52%±3.05%、24.06%±4.25%和17.16%±2.75%,5个组间细胞凋亡率的差异具有统计学意义,且红景天苷浓度越高,HLEC凋亡率越低(F=117.082,P<0.01,两两比较P值均<0.01)。与空白对照组相比,H2O2损伤组Bax和Caspase-3的表达明显增高,Bcl-2的表达明显降低,差异有统计学意义(P值均<0.01)。与H2O2损伤组相比,低、中、高剂量红景天苷组Bcl-2基因表达均上调,Bax和Caspase-3基因表达均下调,其中,高剂量组Bcl-2上调及Bax、Caspase-3下调的更为明显。各组之间差异有统计学意义(Bax:F=493.554,P<0.01: Bcl-2:F=827.820,P<0.01:Caspase-3:F =537.237,P<0.01)。
《医学科学报》 (第19期 第6版 国内期刊), http://www.100md.com