CaS9 可稳定表达的人肿瘤细胞株建立
Crisper/Cas9 技术是目前最有效的基因编辑技术，只需要导向RNA 序列的引导和核酸内切酶Cas9 蛋白的作用，就可以在基因组的特定位点进行DNA 双链切割，从而造成基因组DNA 特定位置的缺失、激活、突变。
北京协和医学院基础学院病理学系，成功建立了多种Cas9 蛋白稳定表达的人肿瘤细胞株，验证细胞中Cas9 的基因编辑活性，方便后续研究中目的基因的编辑。该研究在15 种来自不同组织的人肿瘤细胞株中通过慢病毒感染或克隆筛选的方式建立Cas9 稳定表达的细胞株；在其中3 个细胞株中瞬时转入靶向TSC22 基因的向导RNA，通过基因组PCR、测序及Westernblot 检测Cas9 蛋白的基因编辑活性。
筛选得到69 株Cas9 稳定表达的人肿瘤细胞株，瞬时转入向导RNA 后成功造成了细胞中TSC22 基因的大片段缺失，其中的Cas9 蛋白具有基因编辑活性。目前已有实验室建立了gRNA 文库，此时建立稳定表达Cas9 细胞系更为重要。此次研究在大规模药物筛选、新药作用靶点的筛选以及基因功能检测等方面具有非常重要的意义，结果发表在今年第1 期《中华病理学杂志》上。
《医学科学报》 (第103期 第5版 国内), http://www.100md.com