关于酶联免疫法的理论探索
中图分类号：R446.61文献标识码： A文章编号： 1005-0019(2009)07-0050-02
【摘 要】目的 科学判断酶联免疫结果。方法 应用酶联免疫检测丙型肝炎抗体。结果 不同的实验室所出报告有所不同。结论 从原理上以及平时实践中总结认为结果判断还有细致、周到的地方。
【关键词】酶联免疫;动态;颜色
酶联免疫法检测抗原、抗体，因其实用、经济、快速、准确、经典，只要有蒸留水，拿出试剂盒即可使用。在临床检验医学中，已被广泛运用。在实际工作中，经过摸索与理论的思考，认为反应结果的判断，仅依靠颜色或数据，来判断血液内待测物质的真实成分，发放检验报告，还有一些细微的地方，为此，发表一点探索性的思考。
酶联免疫法检测的最关键的是根据最终反应颜色的有无、深浅去判定结果，在酶标仪读数也达不到判定阳性结果标准的情况下，所测定标本是否就没有所测定的物质呢？
, http://www.100md.com
1 测定结果阳性只是说明含量的问题
酶联免疫法测定结果显示阳性，说明所测定标本中含有目标物质，例如乙型肝炎表面抗原测定为阳性，只是说明血液中乙肝病毒的存在，而且达到了可以测定的标准，但并不是说，血管内流动的全是乙肝病毒，只是一个含量的问题。
2 酶联免疫法有前带和后带的问题
酶联免疫测定原理明确指出，如果抗原的含量过高，抗原将会分别与固相抗体及酶标抗体分别结合，从而影响正常的反应而导致结果偏低，在临床也是司空见惯的。比如，乙肝表面抗原弱阳性，乃至极弱阳性，做两对半检查时，可以发现e抗体、核心抗体也为阳性，也就是平时说的“小三阳”。其实乙肝表面抗原的真实含量是较高的。
3 眼睛的颜色识别
做个理论上的推测，假如在反应完成后的固相小杯子里，有100微升左右的液体，里面只有一个分子的“固相抗体-抗原-酶标抗体-酶标显色”分子，那颜色是极浅的，眼睛能看的出来吗？肯定不能，仪器的比色能显示吗？也不能。那你说被测定的标本里没有被测定物质吗？显然不能，就是说现有的测定方法，还不能判断。人体某种非自身成分在含量较低的情况下，人体免疫系统能完全清除吗？人体免疫系统和非己物质的相互存在也是个动态变化过程，看彼此的能力谁强谁弱。
, 百拇医药
4 结果判断的由来
在各种试剂使用说明书上，都明确说明，例如：临届值(CUT-OFF值)=0.10+阴性对照OD平均值(阴性对照小于某数值按某数值计算)，测定标本OD值大于等于临届值时为阳性,小于临届值时为阴性。经过酶标仪比色，大于1.0时才能报告阳性，不知道他的理论来源。在实际生活中也有以1.0为死标准的,认为大于的数值才能报告阳性,小于的一定要报阴性,还是缺少严密的科学性。在于一个合理的解释。
5 在于分析总结
基层单位一般没有酶标仪，很早以前即使二级、三级医院检验科也没有，现在已基本普及了。我很早做时就在想，即使颜色很低，也不能说明就报告阴性。一般报告弱阳性，给被检测人员很好的提示性解释。
6 基本原理
根据免疫学原理，抗原与抗体间的结合与反应是一一对应的，没有相应的抗原与相应的抗体，给它提供最好的反应条件，即使放上一百年也不会有反映结果的。还有一种情况就是，有与被测定物质有类似化学结构的物质的干扰，出现类似的反应，从而出现一定的颜色反应。
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7 试剂质量
试剂质量是检验人员的关键所在，再好的工作人员与再好的仪器、设备，没有符合要求的试剂，测定结果肯定受影响的，固相載体的“包被”与“封闭”的技术还是有差别的。做为试剂供应商，肯定说试剂怎样怎样好，不可能说，我的试剂质量不好的，谁发证书谁把关。
8 探索的解释
在临床工作中，如果检测结果发现颜色介于阳性对照与无色之间，可以报告弱阳性、乃至极弱阳性，告知接受检验人员，其体内待测物质含量也许很低或很高，也有其他干扰物质的可能，需要及时复查，动态跟踪，也可以做进一步更深层次的检查(如DNA检测)。还有就是内部检查，彻底检查自己的仪器试剂与操作等情况，以便于及时发现问题，加以改正。
9 在探索中前进
中国人都知道，有“摸着石头过河”的理论。在做任何工作时，不应该惧怕问题，只有在现有理论的基础上，不断总结、探索，才能前进，克服前进中的问题，把理论与实践推向一个新的高峰。基层单位不一定都有酶标仪，一般医院都有酶标仪，在做临床检验质量控制时是需要酶标仪的，并需报告、记录所得“CUT-OFF”值的、进行统计学分析。
10 探索性思维
酶联免疫法检测如果达到阳性标准，直接报告阳性，一点颜色都没有，报告阴性也没有问题，在小于阳性标准颜色偏浅、所用试剂质量可靠、操作规范的时侯，为什么不可以报告弱阳性与极弱阳性呢，并给受检查的人员合适的解释：免疫检测的原理以及机体与病源菌之间的彼涨彼消的动态进程与最终结果，人体的抵抗力量不一样，包括进一步检查与隔时复查等等。干扰物，和所测定的对象，有类似的分子结构，或有相似的能够显色的反应。也有人建议，增加检验医嘱，告知情况，若过一段时间为阳性，或许以前是潜伏期，病原体与人体是一个两个方面的相互作用的关系，某一时段内，是彼此的动态变化。需要说明的都表达了，就达到更为优秀的人性化服务、更加严密、科学。, 百拇医药(许根友)
【摘 要】目的 科学判断酶联免疫结果。方法 应用酶联免疫检测丙型肝炎抗体。结果 不同的实验室所出报告有所不同。结论 从原理上以及平时实践中总结认为结果判断还有细致、周到的地方。
【关键词】酶联免疫;动态;颜色
酶联免疫法检测抗原、抗体，因其实用、经济、快速、准确、经典，只要有蒸留水，拿出试剂盒即可使用。在临床检验医学中，已被广泛运用。在实际工作中，经过摸索与理论的思考，认为反应结果的判断，仅依靠颜色或数据，来判断血液内待测物质的真实成分，发放检验报告，还有一些细微的地方，为此，发表一点探索性的思考。
酶联免疫法检测的最关键的是根据最终反应颜色的有无、深浅去判定结果，在酶标仪读数也达不到判定阳性结果标准的情况下，所测定标本是否就没有所测定的物质呢？
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1 测定结果阳性只是说明含量的问题
酶联免疫法测定结果显示阳性，说明所测定标本中含有目标物质，例如乙型肝炎表面抗原测定为阳性，只是说明血液中乙肝病毒的存在，而且达到了可以测定的标准，但并不是说，血管内流动的全是乙肝病毒，只是一个含量的问题。
2 酶联免疫法有前带和后带的问题
酶联免疫测定原理明确指出，如果抗原的含量过高，抗原将会分别与固相抗体及酶标抗体分别结合，从而影响正常的反应而导致结果偏低，在临床也是司空见惯的。比如，乙肝表面抗原弱阳性，乃至极弱阳性，做两对半检查时，可以发现e抗体、核心抗体也为阳性，也就是平时说的“小三阳”。其实乙肝表面抗原的真实含量是较高的。
3 眼睛的颜色识别
做个理论上的推测，假如在反应完成后的固相小杯子里，有100微升左右的液体，里面只有一个分子的“固相抗体-抗原-酶标抗体-酶标显色”分子，那颜色是极浅的，眼睛能看的出来吗？肯定不能，仪器的比色能显示吗？也不能。那你说被测定的标本里没有被测定物质吗？显然不能，就是说现有的测定方法，还不能判断。人体某种非自身成分在含量较低的情况下，人体免疫系统能完全清除吗？人体免疫系统和非己物质的相互存在也是个动态变化过程，看彼此的能力谁强谁弱。
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4 结果判断的由来
在各种试剂使用说明书上，都明确说明，例如：临届值(CUT-OFF值)=0.10+阴性对照OD平均值(阴性对照小于某数值按某数值计算)，测定标本OD值大于等于临届值时为阳性,小于临届值时为阴性。经过酶标仪比色，大于1.0时才能报告阳性，不知道他的理论来源。在实际生活中也有以1.0为死标准的,认为大于的数值才能报告阳性,小于的一定要报阴性,还是缺少严密的科学性。在于一个合理的解释。
5 在于分析总结
基层单位一般没有酶标仪，很早以前即使二级、三级医院检验科也没有，现在已基本普及了。我很早做时就在想，即使颜色很低，也不能说明就报告阴性。一般报告弱阳性，给被检测人员很好的提示性解释。
6 基本原理
根据免疫学原理，抗原与抗体间的结合与反应是一一对应的，没有相应的抗原与相应的抗体，给它提供最好的反应条件，即使放上一百年也不会有反映结果的。还有一种情况就是，有与被测定物质有类似化学结构的物质的干扰，出现类似的反应，从而出现一定的颜色反应。
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7 试剂质量
试剂质量是检验人员的关键所在，再好的工作人员与再好的仪器、设备，没有符合要求的试剂，测定结果肯定受影响的，固相載体的“包被”与“封闭”的技术还是有差别的。做为试剂供应商，肯定说试剂怎样怎样好，不可能说，我的试剂质量不好的，谁发证书谁把关。
8 探索的解释
在临床工作中，如果检测结果发现颜色介于阳性对照与无色之间，可以报告弱阳性、乃至极弱阳性，告知接受检验人员，其体内待测物质含量也许很低或很高，也有其他干扰物质的可能，需要及时复查，动态跟踪，也可以做进一步更深层次的检查(如DNA检测)。还有就是内部检查，彻底检查自己的仪器试剂与操作等情况，以便于及时发现问题，加以改正。
9 在探索中前进
中国人都知道，有“摸着石头过河”的理论。在做任何工作时，不应该惧怕问题，只有在现有理论的基础上，不断总结、探索，才能前进，克服前进中的问题，把理论与实践推向一个新的高峰。基层单位不一定都有酶标仪，一般医院都有酶标仪，在做临床检验质量控制时是需要酶标仪的，并需报告、记录所得“CUT-OFF”值的、进行统计学分析。
10 探索性思维
酶联免疫法检测如果达到阳性标准，直接报告阳性，一点颜色都没有，报告阴性也没有问题，在小于阳性标准颜色偏浅、所用试剂质量可靠、操作规范的时侯，为什么不可以报告弱阳性与极弱阳性呢，并给受检查的人员合适的解释：免疫检测的原理以及机体与病源菌之间的彼涨彼消的动态进程与最终结果，人体的抵抗力量不一样，包括进一步检查与隔时复查等等。干扰物，和所测定的对象，有类似的分子结构，或有相似的能够显色的反应。也有人建议，增加检验医嘱，告知情况，若过一段时间为阳性，或许以前是潜伏期，病原体与人体是一个两个方面的相互作用的关系，某一时段内，是彼此的动态变化。需要说明的都表达了，就达到更为优秀的人性化服务、更加严密、科学。, 百拇医药(许根友)